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目的 探讨天花粉蛋白通过全长型脾络氨酸激酶[full-length form of spleen tyrosine kinase,Syk(L)]基因去甲基化途径恢复Syk(L)表达对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭迁移的的抑制作用.方法 采用CCK-8法及Transwell实验检测不同浓度天花粉在不同时间点对Hep-2细胞增殖及处理72h后细胞侵袭迁移能力的影响;采用MS-HRM法、Q-RT-PCR及Westernblot法检测不同浓度天花粉蛋白对Hep-2细胞Syk(L)基因甲基化水平及其表达的影响.结果 CCK-8结果显示,天花粉蛋白对喉癌Hep-2细胞的增殖有抑制作用,且呈浓度、结果时间依赖性;Transwell结果显示,天花粉蛋白能显著抑制Hep-2细胞的侵袭迁移能力;MS-HRM结果显示,天花粉蛋白可以逆转Hep-2细胞Sky(L)基因的高甲基化状态,恢复Syk(L) mRNA及蛋白的表达.结论 天花粉蛋白通过逆转Syk(L)基因启动子CpG岛的甲基化状态,使喉癌Hep-2细胞中Syk(L)基因表达活化,恢复Syk mRNA及蛋白的表达,最终发挥抑癌基因的作用抑制Hep-2细胞恶性生物学行为,具有开发并成为抗肿瘤药物的潜在价值.

作者:金巧智;李志海;蔡志毅;陈武兵;王雪

来源:医学研究杂志 2018 年 47卷 3期

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作者:
金巧智;李志海;蔡志毅;陈武兵;王雪
来源:
医学研究杂志 2018 年 47卷 3期
标签:
天花粉蛋白 喉癌 全长型脾络氨酸激酶 去甲基化 Trichosanthin Laryngeal carcinoma Full-length form of spleen tyrosine kinase Demethylation
目的 探讨天花粉蛋白通过全长型脾络氨酸激酶[full-length form of spleen tyrosine kinase,Syk(L)]基因去甲基化途径恢复Syk(L)表达对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭迁移的的抑制作用.方法 采用CCK-8法及Transwell实验检测不同浓度天花粉在不同时间点对Hep-2细胞增殖及处理72h后细胞侵袭迁移能力的影响;采用MS-HRM法、Q-RT-PCR及Westernblot法检测不同浓度天花粉蛋白对Hep-2细胞Syk(L)基因甲基化水平及其表达的影响.结果 CCK-8结果显示,天花粉蛋白对喉癌Hep-2细胞的增殖有抑制作用,且呈浓度、结果时间依赖性;Transwell结果显示,天花粉蛋白能显著抑制Hep-2细胞的侵袭迁移能力;MS-HRM结果显示,天花粉蛋白可以逆转Hep-2细胞Sky(L)基因的高甲基化状态,恢复Syk(L) mRNA及蛋白的表达.结论 天花粉蛋白通过逆转Syk(L)基因启动子CpG岛的甲基化状态,使喉癌Hep-2细胞中Syk(L)基因表达活化,恢复Syk mRNA及蛋白的表达,最终发挥抑癌基因的作用抑制Hep-2细胞恶性生物学行为,具有开发并成为抗肿瘤药物的潜在价值.