目的 探讨连翘提取物对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞A549损伤的影响及其可能作用机制.方法 采用肺炎链球菌感染肺泡上皮细胞A549建立细胞损伤模型,不同剂量的连翘提取物处理细胞;微小RNA-223-3p(micro RNA-223-3p,miR-223-3p)特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-223-3p)及其阴性对照序列(anti-miR-NC)分别转染至A549细胞后用肺炎链球菌培养细胞;miR-223-3p寡核苷酸模拟物(miR-223-3pmimics)转染至A549细胞后用连翘提取物处理细胞,然后用肺炎链球菌培养细胞.MTT、流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡能力;ELISA法检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、γ 干扰素(interferon γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的水平;qRT-PCR法检测miR-223-3p的表达量;Western blotting法检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved cysteinyl aspartate-specific protease-3,cleaved Caspase-3)蛋白表达量.结果 连翘提取物能够以剂量相关方式增强肺炎链球菌感染的A549细胞活力(P<0.05),升高IL-10水平(P<0.05),降低细胞凋亡率和cleaved Caspase-3蛋白表达水平(P<0.05),还可降低miR-223-3p的表达量和IL-6、INF-γ,TNF-α的水平(P<0.05);转染anti
作者:陈丹;胡浚伟;李红叶;冯斌
来源:中草药 2021 年 52卷 24期