目的:寻找癌基因TRE17的结合蛋白.方法:分别构建了TRE17/pGBKT7和TRE17(447)/pGBKT7诱饵质粒,用酵母双杂交技术筛选了人骨骼肌cDNA表达文库,并用GST-Pulldown分析进一步观察了癌基因TRE17与其结合蛋白之间的作用.结果:酵母双杂交分析提示,癌基因TRE17可能结合6种靶蛋白,包括pur alpha、肌球蛋白轻链2、乳酸脱氢酶A和肌钙蛋白C2等,其中,仅肌钙蛋白C2能够既结合全长的癌基因TRE17,又结合仅编码TRE17氨基端447个氨基酸的TRE17(447).GST-Pulldown分析表明TRE17(447)明显结合肌钙蛋白C2,而不是阴性对照GST.结论:肌钙蛋白C2能特异性结合癌基因TRE17,为进一步研究TRE17的恶性转化机制提供了新的线索.
作者:沈传陆
来源:中国病理生理杂志 2005 年 21卷 12期