目的:探讨沉默caspase-3对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖、细胞周期和凋亡的影响.方法:构建靶向caspase-3的shRNA重组慢病毒并转染MSCs,通过real-fime PCR和Western blotting在mRNA及蛋白水平鉴定转染结果.采用MTS法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期.Real-time PCR检测bcl-2和bax mRNA的表达.Hoechst荧光染色法检测细胞的凋亡情况.结果:Real-time PCR和Western blotting结果均表明成功建立稳定转染shRNA-caspase-3的大鼠MSCs细胞株.沉默caspase-3使MSCs的增殖率明显提高(P＜0.05),且S期细胞百分比明显增多,为(52.66±0.30)％.沉默caspase-3后bcl-2 mRNA表达上调,bax mRNA表达下调,bcl-2/bax比值升高(P＜0.05).转染组的细胞凋亡率为(15.01±1.73)％,低于空载体组的(25.67±3.05)％和空白对照组的(23.67±1.16)％ (P ＜0.05).结论:沉默caspase-3能调控MSCs的细胞周期,促进细胞增殖,减少细胞凋亡.
作者：华平；刘家良；杨淞然；江慧琦；王萌；陶俊；杨艳旗
来源：中国病理生理杂志 2013 年 29卷 8期
