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目的原核表达旋毛虫抗原基因Ts88,并对重组蛋白的抗原性进行鉴定.方法免疫筛选cDNA文库得到旋毛虫抗原新基因Ts88,克隆入原核表达载体pET-28c(+),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达.重组蛋白免疫小鼠制备免疫血清,ELISA检测抗体滴度.蛋白质印迹法检测重组蛋白的抗原性.免疫荧光试验确定Ts88蛋白在虫体的分布.结果经原核表达的Ts88重组蛋白,用其免疫小鼠可得到高滴度的抗体血清.蛋白质印迹法结果表明该重组蛋白能与旋毛虫病患者血清、旋毛虫病猪血清、人工感染及人工免疫兔血清反应,不与其他蠕虫病患者血清发生交叉反应,并能识别旋毛虫虫体天然抗原成分.免疫荧光试验显示Ts88蛋白主要分布于虫体体壁.结论成功制备Ts88基因的重组蛋白,证明该蛋白具有较好的抗原性.

作者:雷丽萍;诸欣平;杨静;杨雅平;丁利

来源:中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2004 年 22卷 5期

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作者:
雷丽萍;诸欣平;杨静;杨雅平;丁利
来源:
中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2004 年 22卷 5期
标签:
旋毛虫 原核表达 重组蛋白质类 抗原 鉴定
目的原核表达旋毛虫抗原基因Ts88,并对重组蛋白的抗原性进行鉴定.方法免疫筛选cDNA文库得到旋毛虫抗原新基因Ts88,克隆入原核表达载体pET-28c(+),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达.重组蛋白免疫小鼠制备免疫血清,ELISA检测抗体滴度.蛋白质印迹法检测重组蛋白的抗原性.免疫荧光试验确定Ts88蛋白在虫体的分布.结果经原核表达的Ts88重组蛋白,用其免疫小鼠可得到高滴度的抗体血清.蛋白质印迹法结果表明该重组蛋白能与旋毛虫病患者血清、旋毛虫病猪血清、人工感染及人工免疫兔血清反应,不与其他蠕虫病患者血清发生交叉反应,并能识别旋毛虫虫体天然抗原成分.免疫荧光试验显示Ts88蛋白主要分布于虫体体壁.结论成功制备Ts88基因的重组蛋白,证明该蛋白具有较好的抗原性.