目的 探讨京尼平苷对硝普钠诱导大鼠软骨细胞凋亡的保护作用及机制.方法 取8周龄的SPF级SD大鼠20只,颈椎脱臼处死后,酶消化法提取膝关节软骨细胞.采用硝普钠终浓度0.75、1.00、1.50、2.00 mmol/L,分别加入6孔板软骨细胞中,选取合适终浓度诱导软骨细胞凋亡.终浓度分别为20、40、80、160μg/L的京尼平苷加入96孔板软骨细胞,24 h后CCK-8检测京尼平苷抑制软骨细胞增殖的效果.选择硝普钠终浓度为1 mmol/L,京尼平苷终浓度分别为80、160μg/L的6孔板软骨细胞中,Hoechst34580染色观察凋亡软骨细胞核形态,罗丹明(Rho)123染料检测线粒体膜电位,流式细胞技术检测软骨细胞凋亡;Western印迹法检测凋亡软骨细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、Bax蛋白水平.结果 硝普钠适宜浓度为1.00 mmol/L,且细胞凋亡数与硝普钠浓度呈正相关(P<0.05).京尼平苷在20～160μg/L浓度范围内对体外培养二代软骨细胞无增殖抑制效果(P>0.05).80、160μg/L的京尼平苷对SNP诱导软骨细胞凋亡有一定保护作用,呈剂量依赖(P<0.05);京尼平苷可降低凋亡软骨细胞中iNOS、Bax的表达(P<0.05).结论 京尼平苷对硝普钠诱导大鼠软骨细胞凋亡有一定的保护作用,其机制可能是通过降低软骨细胞iNOS的表达、抑制软骨细胞的凋亡.
作者：李皓；李仁嵩；肖志刚；陈森
来源：中国老年学杂志 2019 年 39卷 1期
