目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)结直肠癌差异表达基因(CRNDE)对膀胱癌(BC)细胞生长和裸鼠成瘤的影响.方法:RT-qPCR检测人BC细胞系T24、5637和UM-UC-3及正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中CRNDE的表达;CRNDE-shRNA1、2、3及其阴性对照shRNA-NC分别转染T24细胞,RT-qPCR检测CRNDE表达量,筛选敲低效率最高的shRNA.然后将T24细胞分为对照组、shRNA-NC组和CRNDE-shRNA1组,shRNA-NC组和CRNDE-shRNA1组分别转染shRNA-NC和CRNDE-shRNA1序列.克隆形成实验检测细胞增殖能力,RT-qPCR检测增殖细胞核抗原(Ki67)和生存素(Survivin)mRNA表达,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测活化胱天蛋白酶3和活化胱天蛋白酶9的表达.将转染shRNA-NC和CRNDE-shRNA1的T24细胞分别皮下注射构建小鼠移植瘤模型,记录肿瘤体积并称重,TUNEL染色及免疫组化检测肿瘤组织中癌细胞凋亡和Survivin阳性细胞数.结果:人BC细胞系中CRNDE表达显著高于正常膀胱上皮细胞(P<0.05);CRNDE-shRNA1组CRNDE mRNA表达量最低(P<0.05),选择CRNDE-shRNA1进行后续实验.与对照组相比,下调CRNDE明显降低T24细胞的克隆形成及Ki67和Survivin mRNA表达(P<0.05),显著促进细胞凋亡及活化胱天蛋白酶3和活化胱天蛋白酶9表达(P<0.05).体内实验表明,下调CRNDE表达可显著抑制小鼠

作者：黄润华；李利军；陈思媛；田雪梅；王帆

来源：中国免疫学杂志 2022 年 38卷 16期