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目的:探讨青藤碱对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡、炎症的影响及其对LncRNA BLACAT1的调控作用.方法:采用脂多糖(LPS)诱导软骨细胞建立骨关节炎软骨细胞损伤模型,加入不同浓度的青藤碱处理细胞,si-NC、si-BLACAT1分别转染软骨细胞后加入LPS处理细胞,pcDNA、pcDNA-BLACAT1分别转染入软骨细胞后加入青藤碱与LPS处理细胞;采用qRT-PCR法检测BLACAT1的表达量;采用CCK-8实验检测细胞增殖能力;采用平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用ELISA法检测IFN-γ、TNF-α的水平;采用Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白表达量.结果:青藤碱可降低LPS诱导的软骨细胞中BLACAT1的表达水平、凋亡率、Bax蛋白水平和IFN-γ、TNF-α的水平,并可增加细胞活力及克隆形成数,还可提高Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学意义(P<0.05);转染si-BLACAT1能够增强LPS诱导的软骨细胞活力及克隆形成数,降低凋亡率、Bax蛋白水平及IFN-γ、TNF-α的水平,提高Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学意义(P<0.05);BLACAT1过表达可明显逆转青藤碱对LPS诱导的软骨细胞增殖、克隆形成、凋亡及炎症的作用.结论:青藤碱可通过下调BLACAT1的表达而增强LPS诱导的软骨细胞增殖及克隆形成能力,并可抑制细胞凋亡、炎症反应从而减轻骨关节炎

作者:陈晨;郑润泉;李宗玉

来源:中国免疫学杂志 2022 年 38卷 17期

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作者:
陈晨;郑润泉;李宗玉
来源:
中国免疫学杂志 2022 年 38卷 17期
标签:
青藤碱 LncRNA BLACAT1 骨关节炎 软骨细胞 增殖 凋亡
目的:探讨青藤碱对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡、炎症的影响及其对LncRNA BLACAT1的调控作用.方法:采用脂多糖(LPS)诱导软骨细胞建立骨关节炎软骨细胞损伤模型,加入不同浓度的青藤碱处理细胞,si-NC、si-BLACAT1分别转染软骨细胞后加入LPS处理细胞,pcDNA、pcDNA-BLACAT1分别转染入软骨细胞后加入青藤碱与LPS处理细胞;采用qRT-PCR法检测BLACAT1的表达量;采用CCK-8实验检测细胞增殖能力;采用平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用ELISA法检测IFN-γ、TNF-α的水平;采用Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白表达量.结果:青藤碱可降低LPS诱导的软骨细胞中BLACAT1的表达水平、凋亡率、Bax蛋白水平和IFN-γ、TNF-α的水平,并可增加细胞活力及克隆形成数,还可提高Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学意义(P<0.05);转染si-BLACAT1能够增强LPS诱导的软骨细胞活力及克隆形成数,降低凋亡率、Bax蛋白水平及IFN-γ、TNF-α的水平,提高Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学意义(P<0.05);BLACAT1过表达可明显逆转青藤碱对LPS诱导的软骨细胞增殖、克隆形成、凋亡及炎症的作用.结论:青藤碱可通过下调BLACAT1的表达而增强LPS诱导的软骨细胞增殖及克隆形成能力,并可抑制细胞凋亡、炎症反应从而减轻骨关节炎