目的 探讨无血清条件对诱导pEGFP-C1/Akt转染的骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡的影响. 方法实验分实验组(pEGFP-C1/Akt转染MSCs)、抑制组(pEGFP-C1/Akt转染MSCs+PI3K/Akt 特异性抑制剂)和对照组(MSCs).在无血清培养基条件下,分别在4、12、24和36 h 共4个时间点利用RT-PCR检测Akt及Caspase-3 mRNA表达,Western blot检测Akt蛋白表达,免疫组化检测Caspase-3蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率. 结果在无血清培养4、12、24和36 h 后,实验组的Akt mRNA和蛋白的表达均高于抑制组及对照组(P<0.01), Caspase-3 mRNA及蛋白的表达水平和细胞凋亡率则均低于抑制组及对照组(P<0.01); 抑制组及对照组间Akt和Caspase-3 mRNA及蛋白的表达和凋亡率的差异无统计学意义(P>0.05). 结论 Akt可能通过PI3K/Akt途径抑制其下游底物Caspase-3的表达,从而抑制无血清诱导的MSCs凋亡.
作者:霍鑫;孔宏亮;刘方峰;孟祥民;刘英;张强
来源:中国普外基础与临床杂志 2008 年 15卷 7期