目的对HPV18型DNA疫苗的免疫原性和安全性进行初步评价.方法将HPV1gL1基因与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,构建DNA疫苗质粒pcDNA-L1.使用脂质体将重组质粒转染COS-7细胞,用Western blot检测体外瞬时表达的抗原.将重组质粒pcDNA-L1肌肉注射BALB/c小鼠(100μg/只),加强免疫3次后分别采集血清,用ELISA法和Westernblot法检测抗体,实时荧光定量PCR法检测质粒的组织分布.采用ELISA法检测DNA疫苗免疫后抗核抗体和抗双链DNA抗体的效价.结果重组质粒可在真核细胞中有效地转录和表达HPV18 L1蛋白.小鼠免疫后可检出较高滴度的抗HPV18 L1抗体和特异条带.免疫后质粒主要分布在注射部位,且随着时间延长被清除;未检测到抗核抗体和抗双链DNA抗体.结论HPV18 L1重组质粒可诱导小鼠产生特异的体液免疫反应,且该DNA疫苗是安全的,为进一步研制开发HPV DNA疫苗打下了基础.
作者：李娟；孟淑芳；张春涛；王佑春；尹红章；李德富
来源：中国生物制品学杂志 2005 年 18卷 3期
