目的 探讨可溶性血管内皮生长因子受体2(sKDR)抑制血管内皮细胞增殖及在血管生成中的作用.方法 提取脐静脉内皮细胞(HUVEC)总RNA,扩增KDR基因膜外1～4 结构域, 构建原核表达载体pQE40-KDR,转化E.coli M15,经IPTG诱导表达,镍离子柱亲和层析纯化后复性,用Western blot检测sKDR蛋白的表达,MTT比色法和鸡胚尿囊膜(CAM)试验分别检测其对HUVEC增殖的影响及其对血管生成的作用.结果 经RT-PCR扩增得到了1 150 bp左右的sKDR片段,并在pQE40 原核表达系统中表达了sKDR蛋白,以包涵体形式存在.纯化后蛋白电泳呈现相对分子质量50 000左右的单一条带,纯化蛋白占总蛋白的98
作者：李然伟；刘禄成；李哲；王颂；高瑞娟
来源：中国生物制品学杂志 2008 年 21卷 2期
