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目的 构建Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)糖蛋白B(gB)和糖蛋白D(gD)的T细胞表位重组核酸疫苗,并研究其作为核酸疫苗的免疫原性.方法 登录免疫表位数据库(IEDB),查阅已发表的无症状表位,联合运用SYFPEITHI、IEDB等生物信息学软件,预测潜在的HSV-1 gB和gD的T细胞表位.将已知表位和预测表位串联,设计并合成HSV-1 gB、gD的T细胞多表位基因盒(Tg).将Tg克隆入真核表达载体pVAX,构建真核表达质粒pVAX-Tg.pVAX-Tg转染293T细胞,鉴定其蛋白表达.将pVAX-Tg免疫小鼠,检测小鼠血清γ干扰素(IFN-γ)水平的变化.结果 成功构建真核表达质粒pVAX-Tg,且该质粒能够成功转染细胞并表达目的蛋白.将pVAX-Tg免疫小鼠后,血清IFN-γ水平明显升高(P<0.001).结论 本研究成功设计构建HSV-1 gB和gD的T细胞表位核酸疫苗,其能够在体外真核细胞中表达,并能够有效诱导细胞免疫,为HSV-1多表位核酸疫苗的研究奠定了坚实基础.

作者:王丹凤;马小力

来源:中国医科大学学报 2021 年 50卷 2期

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作者:
王丹凤;马小力
来源:
中国医科大学学报 2021 年 50卷 2期
标签:
Ⅰ型单纯疱疹病毒 糖蛋白B 糖蛋白D T细胞表位 核酸疫苗
目的 构建Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)糖蛋白B(gB)和糖蛋白D(gD)的T细胞表位重组核酸疫苗,并研究其作为核酸疫苗的免疫原性.方法 登录免疫表位数据库(IEDB),查阅已发表的无症状表位,联合运用SYFPEITHI、IEDB等生物信息学软件,预测潜在的HSV-1 gB和gD的T细胞表位.将已知表位和预测表位串联,设计并合成HSV-1 gB、gD的T细胞多表位基因盒(Tg).将Tg克隆入真核表达载体pVAX,构建真核表达质粒pVAX-Tg.pVAX-Tg转染293T细胞,鉴定其蛋白表达.将pVAX-Tg免疫小鼠,检测小鼠血清γ干扰素(IFN-γ)水平的变化.结果 成功构建真核表达质粒pVAX-Tg,且该质粒能够成功转染细胞并表达目的蛋白.将pVAX-Tg免疫小鼠后,血清IFN-γ水平明显升高(P<0.001).结论 本研究成功设计构建HSV-1 gB和gD的T细胞表位核酸疫苗,其能够在体外真核细胞中表达,并能够有效诱导细胞免疫,为HSV-1多表位核酸疫苗的研究奠定了坚实基础.