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目的 探讨新型苦参碱衍生物ZS10抑制BEL-7402细胞增殖,诱导细胞凋亡的信号通路.方法 采用有机合成的方法,合成ZS10;采用MTT法,分析在作用时间分别为24、48、72 h时,ZS10对BEL-7402细胞增殖的抑制作用,计算IC50;采用DAPI染色法,观察BEL-7402细胞状态;采用克隆形成法,观察BEL-7402细胞集落形成情况;采用流式细胞仪观察BEL-7402细胞周期阻滞情况和凋亡情况;采用Western blot法检测PI3K-AKT通路及相关蛋白表达水平.结果 获得新型苦参碱衍生物ZS10,并进行了结构表征;MTT结果表明,ZS10作用于BEL-7402细胞48 h,IC50为(6.62±1.11)μmol·L-1;DAPI染色结果表明,给药浓度升高,细胞核发生明显改变;克隆形成结果表明,ZS10明显抑制BEL-7402细胞的集落形成;流式细胞术结果表明,ZS10诱导BEL-7402细胞凋亡并阻滞S期.Western blot结果显示,ZS10在浓度为0~8μmol·L-1时,对PI3K/AKT通路及其相关蛋白具有调节作用,并呈剂量依赖性.与对照组比较,给药组PI3 K、AKT、p-AKT和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平均明显降低,促凋亡蛋白Bax表达水平均明显升高,周期蛋白Cyclin D1和CDK2表达水平均明显降低,迁移蛋白EGFR、N-cadherin、Vi-mentin表达降低,E-cadherin表达升高.结论 ZS10对肝癌细胞BEL-7402的生长、增殖具有抑制作用.

作者:王湘;张森;韩科研;曾攀科;李雪娇;王立升

来源:中国药理学通报 2023 年 39卷 1期

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作者:
王湘;张森;韩科研;曾攀科;李雪娇;王立升
来源:
中国药理学通报 2023 年 39卷 1期
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苦参碱衍生物ZS10 BEL-7402细胞 迁移 周期 凋亡 PI3K/AKT信号通路
目的 探讨新型苦参碱衍生物ZS10抑制BEL-7402细胞增殖,诱导细胞凋亡的信号通路.方法 采用有机合成的方法,合成ZS10;采用MTT法,分析在作用时间分别为24、48、72 h时,ZS10对BEL-7402细胞增殖的抑制作用,计算IC50;采用DAPI染色法,观察BEL-7402细胞状态;采用克隆形成法,观察BEL-7402细胞集落形成情况;采用流式细胞仪观察BEL-7402细胞周期阻滞情况和凋亡情况;采用Western blot法检测PI3K-AKT通路及相关蛋白表达水平.结果 获得新型苦参碱衍生物ZS10,并进行了结构表征;MTT结果表明,ZS10作用于BEL-7402细胞48 h,IC50为(6.62±1.11)μmol·L-1;DAPI染色结果表明,给药浓度升高,细胞核发生明显改变;克隆形成结果表明,ZS10明显抑制BEL-7402细胞的集落形成;流式细胞术结果表明,ZS10诱导BEL-7402细胞凋亡并阻滞S期.Western blot结果显示,ZS10在浓度为0~8μmol·L-1时,对PI3K/AKT通路及其相关蛋白具有调节作用,并呈剂量依赖性.与对照组比较,给药组PI3 K、AKT、p-AKT和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平均明显降低,促凋亡蛋白Bax表达水平均明显升高,周期蛋白Cyclin D1和CDK2表达水平均明显降低,迁移蛋白EGFR、N-cadherin、Vi-mentin表达降低,E-cadherin表达升高.结论 ZS10对肝癌细胞BEL-7402的生长、增殖具有抑制作用.