目的:探究miR-32-5p通过靶向zeste基因增强子人类同源物2(EZH2)对胰腺癌PANC-1细胞恶性生物学行为的影响及其分子机制.方法:利用GEPIA数据库分析胰腺癌组织中EZH2的表达水平及其与患者的预后生存期的关系,并分析miR-32-5p表达与患者临床病理因素的关系.qPCR法检测正常胰腺HPDE6-C7细胞和胰腺癌PANC-1、AsPC-1、SW1990细胞中miR-32-5p和EZH2 mRNA 的表达,通过 LipofectamineTM 2000 将 miR-NC、miR-32-5p mimic、miR-32-5p inhibitor、pcDNA-NC、pcDNA EZH2 质粒分别转染PANC-1 细胞,其分为对照组(不转染)、miR-NC 组(转染miR-NC)、miR-32-5p mimic组(转染miR-32-5p mimic)、Anti-miR-32-5p组(转染miR-32-5p inhibitor)、miR-NC+pcDNA-NC 组(转染miR-NC+pcDNA-NC)、miR-NC+pcDNA EZH2 组(转染miR-NC+pcDNA EZH2)、miR-32-5p mimic+pcDNA-NC 组(转染 miR-32-5p mimic+pcDNA-NC)、miR-32-5p mimic+pcDNA EZH2 组(转染 miR-32-5p mimic+pcDNAEZH2).双荧光素酶报告基因实验验证miR-32-5p与EZH2的靶向关系;MTT法及克隆形成实验检测各组细胞的增殖能力,划痕愈合实验检测各组细胞的迁移能力;Transwell小室实验检测各组细胞的侵袭能力,WB法检测各组细胞EZH2、E-cadherin、N-cadherin的表达;裸鼠成瘤实验检测转染后
作者:柳君君;张燕燕;雷衡阳
来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2022 年 29卷 6期