该实验探讨真武汤对体外培养NRK-52E细胞AQP2相关的“AVP-V2R-AQP2”通路的调控作用,初步揭示真武汤调节水分转运平衡的部分分子机制.取SPF级雄性SD大鼠48只,随机分成8组,每组6只.分别给予蒸馏水或真武汤22.68 g·kg-1·d-1(按生药量计)灌胃,心脏采血,3 000 r·min-1离心分离制备含药血清.然后体外培养大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E细胞,给予上述不同给药天数和日给药次数制备的真武汤含药血清和血管加压素类似物1-去氨基-8-右旋-精氨酸加压素(1-desamino-8-D-arginine vasopressin,dDAVP)进行干预,采用实时无标记动态细胞分析技术(Real time cell analysis,RTCA)检测细胞增殖情况;免疫荧光法检测细胞中V2R,AQP2蛋白的分布情况;Western blot法检测V2R,PKA,AQP2的蛋白表达量;Real-time PCR法检测AQP2mRNA水平.结果显示,与正常大鼠血清组比较,每天给药2次连续给药7d制备的真武汤含药血清作用于NRK-52E细胞约24h,可显著上调其AQP2的mRNA水平(P＜0.01);显著增加V2R,PKA,AQP2的蛋白表达量(P ＜0.05,P＜0.01,P＜0.05);该方法制备的真武汤含药血清与dDAVP合用干预NRK-52E细胞后,可显著增加V2R,p-AQP2和AQP2的蛋白表达量(P＜0.01,P＜0.05,P＜0.01).以上实验结果表明,真武汤含药血清能增加NRK-52E细胞“AVP-V2R-AQP2

作者：周小杰；包玉婷；陈红淑；宣玲；陈学明；张洁颖；杨元宵；李昌煜

来源：中国中药杂志 2018 年 43卷 3期