目的 探讨顺铂作用于叶酸结合蛋白(FOLRl)基因表达上调的卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞系SKOV3细胞后对其生物学功能的影响.方法 将FOLR1基因与pWPI质粒进行慢病毒包装,构建重组质粒pWPI-FOLR1并转染入SKOV3后得到pWPI-FOLR1-SKOV3细胞,作为重组质粒转染组；以同样方法将pWPI质粒转染入SKOV3后得到pWPI-SKOV3细胞,作为空载体转染组；并设立未转染的SKOV3细胞为空白对照组,采用逆转录(RT)-PCR技术和蛋白印迹法分别检测3组细胞中FOLR1 mRNA和蛋白的表达.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,检测并绘制3组细胞的生长曲线,检测3组细胞对顺铂的敏感性[以50％抑制浓度(IC50)表示,选择重组质粒转染组的IC50作为下一步实验中顺铂浓度的基准],并检测不同浓度(分别为0.5×IC50、1×IC50、2×IC50,即分别为1.8、3.6、7.2 μg/ml；下同)顺铂作用不同时间(分别为24、48、72 h,下同)后3组细胞生长的抑制率；采用流式细胞仪检测不同浓度顺铂作用不同时间后3组细胞的凋亡率,及不同浓度顺铂作用48 h后3组细胞的细胞周期比例；高效液相色谱法检测同一浓度(3.6 μg/ml)顺铂作用48 h后3组细胞内顺铂的浓度.结果 RT-PCR技术和蛋白印迹法分别检测显示,重组质粒转染组细胞中有FOLR1 mRNA和蛋白的表达,而空载体转染组、空白对照组细胞中无
作者：黄明钜；张玮；王琪；蔡祖艾；李力
来源：中华妇产科杂志 2013 年 48卷 9期
