目的 应用RNA干扰(RNAi)技术沉默hMSH2基因后,观察其对紫杉醇耐药的卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞系OC3/TAX300细胞耐药性的影响.方法 设计靶向沉默耐药基因hMSH2的小分子干扰RNA(siRNA)序列,转染OC3/TAX300细胞(实验组),以转染随机无关序列的细胞为阴性对照组,未转染的细胞为空白对照组.(1)采用实时定量逆转录(RT)-PCR技术和蛋白印迹法分别检测3组细胞中hMSH2 mRNA和蛋白的表达.(2)采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测紫杉醇(2 μg/ml,下同)作用12、24、48、72 h后3组细胞的增殖能力(以细胞生长抑制率表示),流式细胞术检测紫杉醇作用24、48 h后3组细胞的细胞凋亡率和细胞周期比例,透射电镜观察紫杉醇作用48 h后3组细胞的形态学改变.结果 (1)实验组细胞中hMSH2mRNA的相对表达水平为0.004±0.000,低于阴性对照组的0.053±0.006和空白对照组的0.057±0.012(P＜0.05);hMSH2蛋白的相对表达水平为0.19±0.04,低于阴性对照组的1.00±0.07和空白对照组的0.95±0.03(P ＜0.05).(2)紫杉醇作用24、48、72 h后,实验组细胞生长抑制率均明显高于阴性对照组和空白对照组(P＜0.05);紫杉醇作用24、48 h后,实验组细胞的凋亡率和G2/M期细胞比例均明显高于阴性对照组和空白对照组(P＜0.05);而阴性对照组细胞的生长抑制率、凋亡率
作者：王爱新；李健；李红霞
来源：中华妇产科杂志 2014 年 49卷 3期
