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目的用反义寡核苷酸封闭肝癌细胞中survivin基因的表达,研究其诱导细胞凋亡的作用及其机制. 方法用脂质体介导survivin反义寡核苷酸转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡比率,激光共聚焦显微镜观察细胞骨架微丝系统变化,激酶活性检测方法测定细胞内caspase-3活性变化,免疫沉淀法测定细胞内丝裂原活化蛋白激酶p38 (p38MAPK)活性的变化. 结果脂质体介导survivin反义寡核苷酸转染肝癌细胞后Ⅰ~Ⅵ组(空白对照、正义对照、400、600、800、1000ng/ml反义转染组)细胞内p38MAPK活性分别为7.03、7.07、13.47、16.37、43.97及47.87;caspase-3活性分别为0.015±0.010、0.014±0.002、0.026±0.003、0.042±0.001、0.093±0.001及0.100±0.001;Ⅳ~Ⅵ组细胞内p38MAPK及caspase-3活性较对照组明显升高.转染后细胞发生G2/M期阻滞,Ⅰ~Ⅵ组细胞凋亡率分别为0.70

作者:陈涛;田伏洲;蔡忠红;尹致良

来源:中华肝脏病杂志 2003 年 11卷 9期

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作者:
陈涛;田伏洲;蔡忠红;尹致良
来源:
中华肝脏病杂志 2003 年 11卷 9期
标签:
癌,肝细胞 脱噬作用 蛋白激酶类 survivin基因 微丝
目的用反义寡核苷酸封闭肝癌细胞中survivin基因的表达,研究其诱导细胞凋亡的作用及其机制. 方法用脂质体介导survivin反义寡核苷酸转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡比率,激光共聚焦显微镜观察细胞骨架微丝系统变化,激酶活性检测方法测定细胞内caspase-3活性变化,免疫沉淀法测定细胞内丝裂原活化蛋白激酶p38 (p38MAPK)活性的变化. 结果脂质体介导survivin反义寡核苷酸转染肝癌细胞后Ⅰ~Ⅵ组(空白对照、正义对照、400、600、800、1000ng/ml反义转染组)细胞内p38MAPK活性分别为7.03、7.07、13.47、16.37、43.97及47.87;caspase-3活性分别为0.015±0.010、0.014±0.002、0.026±0.003、0.042±0.001、0.093±0.001及0.100±0.001;Ⅳ~Ⅵ组细胞内p38MAPK及caspase-3活性较对照组明显升高.转染后细胞发生G2/M期阻滞,Ⅰ~Ⅵ组细胞凋亡率分别为0.70