目的 探讨PTTG1基因在乙醇诱导的LO2肝细胞急性损伤中的作用.方法 LO2肝细胞中加入0、100、200、400、800、1600 mmol/L不同浓度的乙醇,0、3、6、12、24、48 h不同刺激时间进行预实验,镜下观察细胞形态摸索乙醇损伤模型适合的参数.使用携带PTTG1 shRNA的荧光慢病毒载体感染LO2正常人肝细胞系,嘌呤霉素筛选PTTG1敲低稳转株组(PTTG1/KD组),同时建立空载病毒对照组(PTTG1/vector组),两组按摸索参数加入400 mmol/L乙醇作用24 h.HE染色观察各组细胞爬片的形态变化及损伤程度.Western blot检测PTTG1、凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3等的表达情况.多组PTTG1表达比较采用单因素方差分析和LSD-t检验,两组比较采用t检验.结果 预实验镜下发现,LO2肝细胞在400 mmol/L及24 h出现明显肝细胞急性损伤形态差异,确定为模型实验参数.PTTG1表达量随乙醇浓度升高和时间增加而增加,于400 mmol/L乙醇浓度、24 h达最高(LSD-t=6.90,4.14;P<0.05).HE染色发现乙醇组中PTTG1/KD组凋亡细胞较PTTG1/vector组增多.Western blot结果显示,PTTG1/KD组PTTG1表达量为0.22±0.11,明显低于PTTG1/vector组的1.09±0.11(t=-11.60,P<0.05);而PTTG1/KD组的Cleaved-Caspase3表达量为0.05±0.01,明显高于PTTG1/vector组的0.03(t=8.20,P<0.05).结论 乙

作者：田轩；沙菲菲；王家玉；郭云蔚

来源：中华肝脏外科手术学电子杂志 2020 年 9卷 2期