目的：探讨Smac与卵巢癌耐药及凋亡机制。方法采用RT-PCR、Western blot方法分别从基因和蛋白水平检测卵巢癌细胞系SKOV3及其耐药细胞系SKOV3/DDP中Smac与XIAP的表达水平的差异。构建 Smac真核表达载体pcDNA3.1（＋）/EGFP＋Smac。采用脂质体转染法将pcDNA3.1（＋）/EGFP＋Smac真核表达载体导入卵巢癌顺铂耐药细胞系SKOV3/DDP。运用Western blot法检测转染前后细胞内Smac与XIAP表达的变化，MTT法检测Smac表达增加后细胞生长抑制率，观察 Smac 基因对卵巢癌细胞凋亡的影响。结果 SKOV3、SKOV3/DDP 细胞系中均表达Smac/DIABLO与XIAP，且SKOV3中Smac的相对含量高于SKOV3/DDP。SKOV3中XIAP的相对含量低于SKOV3/DDP。Western blot检测转染后耐药细胞Smac蛋白表达增加，XIAP表达无明显改变。MTT结果转染48 h与72 h后细胞生长抑制率出现明显增加，差异有统计学意义（P＜0.01）。结论 Smac表达的上调对卵巢癌细胞XIAP表达无明显影响，但对肿瘤细胞生长有明显的抑制作用。提示Smac确实促进卵巢癌细胞凋亡，但其凋亡机制并不是促进XIAP降解，而是与XIAP相互结合抑制其与caspase结合，激活caspase进而起到促凋亡作用。
作者：强娟；张虹
来源：中华临床医师杂志（电子版） 2014 年 22期
