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目的 研究酪氨酸激酶Src和酪氨酸磷酸酶SHP-2在脓毒症相关性脑病中的变化及其意义. 方法 Wistar大鼠88只按照随机数字表法分为脓毒症组(n=80)和对照组(n=8).脓毒症组大鼠通过腹腔注射革兰阴性菌脂多糖(LPS) 10 mg/kg建立脓毒症相关性脑病模型(32只大鼠成功建模),并分别在建模后6h、12h、24 h和48 h处死大鼠并取脑组织.对照组大鼠给予腹腔注射10mg/kg 0.9%生理盐水后即刻处死,取脑组织作为对照组标本.通过Westem blotting、实时定量PCR(RT-PCR)和免疫荧光染色法观察Src和SHP-2蛋白及mRNA的变化.比较给予活性Src和SHP-2蛋白与线粒体蛋白反应前后呼吸链复合物酶活性的变化情况. 结果 Western blotting 、RT-PCR结果显示脓毒症组大鼠Src在6h出现明显的下降,持续至48 h;同时间段SHP-2则出现明显的上升,与对照组比较差异均具有统计学意义(P<0.05).免疫荧光染色结果也显示48 h脓毒症组大鼠Src表达较对照组明显下降,而SHP-2表达则明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).与活性Src蛋白反应后,48 h脓毒症组大鼠呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ酶活性明显升高,与活性SHP-2蛋白反应后呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ酶活性明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05). 结论 脓毒症相关性脑病模型中,酪氨酸激酶Src和酪氨酸磷酸酶SHP-2可

作者:吕娟娟;郑贵浪;陈志江;王斌;陶少华;项丹;谢美燕;刘翠;黄锦达

来源:中华神经医学杂志 2015 年 14卷 12期

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作者:
吕娟娟;郑贵浪;陈志江;王斌;陶少华;项丹;谢美燕;刘翠;黄锦达
来源:
中华神经医学杂志 2015 年 14卷 12期
标签:
脓毒症相关性脑病 线粒体功能障碍 酪氨酸激酶 酪氨酸磷酸酶 Sepsis-associated encephalopathy Mitochondrial dysfunction Tyrosine kinase Tyrosine phosphatase
目的 研究酪氨酸激酶Src和酪氨酸磷酸酶SHP-2在脓毒症相关性脑病中的变化及其意义. 方法 Wistar大鼠88只按照随机数字表法分为脓毒症组(n=80)和对照组(n=8).脓毒症组大鼠通过腹腔注射革兰阴性菌脂多糖(LPS) 10 mg/kg建立脓毒症相关性脑病模型(32只大鼠成功建模),并分别在建模后6h、12h、24 h和48 h处死大鼠并取脑组织.对照组大鼠给予腹腔注射10mg/kg 0.9%生理盐水后即刻处死,取脑组织作为对照组标本.通过Westem blotting、实时定量PCR(RT-PCR)和免疫荧光染色法观察Src和SHP-2蛋白及mRNA的变化.比较给予活性Src和SHP-2蛋白与线粒体蛋白反应前后呼吸链复合物酶活性的变化情况. 结果 Western blotting 、RT-PCR结果显示脓毒症组大鼠Src在6h出现明显的下降,持续至48 h;同时间段SHP-2则出现明显的上升,与对照组比较差异均具有统计学意义(P<0.05).免疫荧光染色结果也显示48 h脓毒症组大鼠Src表达较对照组明显下降,而SHP-2表达则明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).与活性Src蛋白反应后,48 h脓毒症组大鼠呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ酶活性明显升高,与活性SHP-2蛋白反应后呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ酶活性明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05). 结论 脓毒症相关性脑病模型中,酪氨酸激酶Src和酪氨酸磷酸酶SHP-2可