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目的 观察自噬在小鼠脑缺血再灌注损伤中的作用.方法 建立小鼠局灶性脑缺血再灌注模型,Western blot法和免疫荧光法检测自噬相关蛋白表达,红四氮唑(TTC)染色法检测抑制自噬对缺血再灌注损伤后脑梗死面积的影响,Longa法检测抑制自噬对缺血再灌注损伤后神经症状评分的影响.结果 Western blot结果显示,再灌注后损伤缺血皮层的微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、Beclin-1蛋白表达水平明显增加,呈时间依赖性,12h达到高峰.免疫荧光法显示,缺血再灌注后6h及12 h神经元胞质内点状荧光颗粒表达逐渐增强.给予3-甲基腺嘌呤(3-MA)能显著降低缺血皮层的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,减少脑梗死面积,并减轻神经行为学损伤(P<0.05).结论 脑缺血再灌注损伤后自噬的过度激活可能促进神经元的死亡.

作者:李键;秦宣锋;徐锋

来源:中华实验外科杂志 2013 年 30卷 9期

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作者:
李键;秦宣锋;徐锋
来源:
中华实验外科杂志 2013 年 30卷 9期
标签:
自噬 缺血再灌注 神经元 Autophagy Cerebral ischemia and reperfusion Neuron
目的 观察自噬在小鼠脑缺血再灌注损伤中的作用.方法 建立小鼠局灶性脑缺血再灌注模型,Western blot法和免疫荧光法检测自噬相关蛋白表达,红四氮唑(TTC)染色法检测抑制自噬对缺血再灌注损伤后脑梗死面积的影响,Longa法检测抑制自噬对缺血再灌注损伤后神经症状评分的影响.结果 Western blot结果显示,再灌注后损伤缺血皮层的微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、Beclin-1蛋白表达水平明显增加,呈时间依赖性,12h达到高峰.免疫荧光法显示,缺血再灌注后6h及12 h神经元胞质内点状荧光颗粒表达逐渐增强.给予3-甲基腺嘌呤(3-MA)能显著降低缺血皮层的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,减少脑梗死面积,并减轻神经行为学损伤(P<0.05).结论 脑缺血再灌注损伤后自噬的过度激活可能促进神经元的死亡.