目的 探讨酪氨酸激酶(JAK)抑制剂AG490对血管内皮细胞抗过氧化氢(H2O2)损伤的保护作用及其机制.方法 分别用不同浓度H2O2(100、200、400 μmol/L)处理体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)2、4、6h,噻唑蓝(MTT)法测定内皮细胞活力;H2O2(400 μmol/L)建立HUVECs损伤模型,实验分4组:对照组、H2O2组、H2O2+ AG490(20μmol/L)组、AG490(20μmol/L)组.各组细胞处理4h,MTT法检测各组细胞存活率;原位末端转移酶标记(TUNEL)法测定各组细胞凋亡率;Western blot法检测各组细胞中磷酸化酪氨酸蛋白激酶2(p-JAK2)、磷酸化信号传导与转录激活因子-3(p-STAT3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)的表达.结果 经不同浓度的H2O2(100、200、400 μmol/L)处理内皮细胞2、4、6h后,内皮细胞的存活率明显降低(P ＜0.01);AG490能明显提高H2O2损伤的内皮细胞存活率,降低细胞凋亡率(存活率H2O2组:0.637 ±0.030、H2O2 +AG 20 μmol/L组:0.847±0.030;凋亡率H2O2组:59.104±1.572、H2O2+ AG 20μmol/L组:36.454±1.403,P＜0.01);经AG490和H2O2共处理的内皮细胞与H2O2损伤组比较,p-JAK2和p-STAT3的表达显著降低(P＜0.01);凋亡相关蛋白bax的表达显著降低,但是抗凋亡蛋白bcl-2的表达显著升高(P＜0.01).

作者：梁振兴；杨阳；金振晓；易定华；段维勋；陈文生

来源：中华实验外科杂志 2014 年 31卷 4期