目的:探讨蛋白激酶B1(Akt1)基因介导内质网类似激酶(PERK)/真核细胞翻译启始子2α(eIF2α)信号通路参与肺癌细胞增殖及细胞凋亡的机制。方法:选择人肺腺癌细胞系A549按实验转染方案随机分组,分为空白(Blank)组、沉默Akt1(si-Akt1)阴性对照(NC)组、si-Akt1组、过表达Akt1(OE-Akt1) NC组、OE-Akt1组、CCT020312(PERK选择性激动剂)组和OE-Akt1+CCT020312组。应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞中相关基因的mRNA和蛋白表达水平;同时分别应用噻唑蓝(MTT)法和流式细胞术检测各组细胞增殖和凋亡水平。两组间比较为
t检验,多组间比较采用单因素方差分析。
结果:Si-Akt1组的Akt1的mRNA(0.99±0.05比0.45±0.03,
t=16.04,
P<0.05)和蛋白表达(0.32±0.03比0.12±0.01,
t=10.95,
P<0.05)低于si-Akt1 NC组。si-Akt1组PERK/p-PERK、eIF2α/p-eIF2α、GRP78和CHOP的mRNA(PERK:0.97±0.04比1.77±0.07,
t=17.190,
P<0.05;eIF2α:1.01±0.06比1.53±0.06,
t=10.610,
P<0.05;GRP78:1.06±0.03比1.98±0.08,
t=18.650,
P<0.05;CHOP:0.94±0.04比1.63±0.06,
t=16.
作者:蔡仁中;廖绪强;黄明芳;黎亮
来源:中华实验外科杂志 2021 年 38卷 4期