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目的 通过观察蛋白激酶C(PKC)-alpha基因敲除鼠血清加压素(AVP)水平及髓内水通道蛋白2(AQP-2)分布、表达和转运状态的变化,初步探讨PKC-alpha在小鼠尿浓缩功能中的调节机制.方法 使用代谢箱收集PKC-alpha基因敲除鼠及SV129野生鼠24h尿液并取血,采用渗透计检测尿渗透浓度.ELISA法检测正常饮食下24 h尿尿素排泄量.放射性免疫法(RIA)检测血清AVP水平.免疫荧光及半定量免疫印迹技术检测小鼠内髓AQP-2的分布和表达情况.分别使用V2受体拮抗剂SR141263及不同浓度去氨基精加压素(DdAVP)腹腔内注射,检测3 h内尿渗透浓度、尿量以观察两组小鼠AQP-2转运状态.结果 正常饮食下PKC-alpha基因敲除鼠24 h尿尿素排泄量[(3.25±0.18)mmol/24 h比(3.83±0.42)mmol/24 h,P=0.24]以及血清AVP水平[(4.64±0.43)pmol/L比[(5.03±0.44)pmol/L,P=0.55]与野生鼠相比,差异均无统计学意义.两组小鼠内髓AQP-2的分布及表达相似(P=0.48).不同浓度DdAVP腹腔注射后两组小鼠尿量变化曲线完全一致.SR141263腹腔注射后PKC-alpha基因敲除鼠及野生鼠尿渗透浓度改变之间差异也无统计学意义[(0.20±0.02)mmol/L比(0.20±0.04)mmol/L,P=0.97].结论 PKC-alpha参与调节的小鼠尿浓缩功能与血清AVP水平、髓内AQP-2状态无关.

作者:姚丽君;赵鸿;邓安国;刘建社

来源:中华肾脏病杂志 2006 年 22卷 11期

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作者:
姚丽君;赵鸿;邓安国;刘建社
来源:
中华肾脏病杂志 2006 年 22卷 11期
标签:
蛋白激酶C 肾浓缩能力 水通道蛋白2 血管升压素类
目的 通过观察蛋白激酶C(PKC)-alpha基因敲除鼠血清加压素(AVP)水平及髓内水通道蛋白2(AQP-2)分布、表达和转运状态的变化,初步探讨PKC-alpha在小鼠尿浓缩功能中的调节机制.方法 使用代谢箱收集PKC-alpha基因敲除鼠及SV129野生鼠24h尿液并取血,采用渗透计检测尿渗透浓度.ELISA法检测正常饮食下24 h尿尿素排泄量.放射性免疫法(RIA)检测血清AVP水平.免疫荧光及半定量免疫印迹技术检测小鼠内髓AQP-2的分布和表达情况.分别使用V2受体拮抗剂SR141263及不同浓度去氨基精加压素(DdAVP)腹腔内注射,检测3 h内尿渗透浓度、尿量以观察两组小鼠AQP-2转运状态.结果 正常饮食下PKC-alpha基因敲除鼠24 h尿尿素排泄量[(3.25±0.18)mmol/24 h比(3.83±0.42)mmol/24 h,P=0.24]以及血清AVP水平[(4.64±0.43)pmol/L比[(5.03±0.44)pmol/L,P=0.55]与野生鼠相比,差异均无统计学意义.两组小鼠内髓AQP-2的分布及表达相似(P=0.48).不同浓度DdAVP腹腔注射后两组小鼠尿量变化曲线完全一致.SR141263腹腔注射后PKC-alpha基因敲除鼠及野生鼠尿渗透浓度改变之间差异也无统计学意义[(0.20±0.02)mmol/L比(0.20±0.04)mmol/L,P=0.97].结论 PKC-alpha参与调节的小鼠尿浓缩功能与血清AVP水平、髓内AQP-2状态无关.