目的 探讨藁本内酯(LIG)对重组人热休克蛋白60(HSP60)诱导的THP-1源性巨噬细胞炎症反应的作用及机制.方法 THP-1细胞经佛波酯诱导分化为巨噬细胞后,以免疫荧光法筛选出髓样分化因子88(MyD88)的siRNA最佳转染浓度.将巨噬细胞分为6组(n=3),包括空白对照组(siRNA转染试剂)、模型组(siRNA转染试剂+HSP60 10 mg/L)、阴性对照组(MyD88阴性对照品+ HSP60 10 mg/L)、RNAi组(MyD88 siRNA+ HSP60 10 mg/L)、LIG组(siRNA转染试剂+HSP6010 mg/L+ LIG 20 mg/L)和RNAi+ LIG组(MyD88 siRNA+ HSP60 10 mg/L+ LIG 20 mg/L).采用Western blot法检测巨噬细胞中MyD88及磷酸化核因子-κB (p-NF-κB)的蛋白表达水平,采用ELISA法检测细胞培养上清液中的肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量.结果 (1)模型组的MyD88(1.196±0.125比0.341±0.063,P<0.01)和p-NF-κB(0.817±0.034比0.312 ±0.046,P<0.01)蛋白相对表达水平均高于空白对照组;RNAi组的MyD88(0.554±0.043)和p-NF-κB (0.538±0.063)蛋白相对表达水平均低于模型组(P均<0.01),而高于空白对照组(P均<0.05);LIG组MyD88(0.694±0.087)及p-NF-κB(0.669±0.043)蛋白相对表达水平均低于模型组(P<0.05或0.01),而高于RNAi组(P均<0.05)及空白对照组(P均<0.01
作者:高颖;陈蕊;顾宁;何小丽;杨志军;左可可
来源:中华心血管病杂志 2016 年 44卷 9期