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目的研究应用载体表达短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术抑制人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞survivin基因的表达,探讨survivin基因表达缄默对Jurkat细胞凋亡和增殖的影响.方法构建针对survivin基因的shRNA重组质粒并转染至Jurkat细胞,分别用多重PCR和Western blot法检测瞬时转染和稳定转染细胞survivin基因mRNA和蛋白表达水平的变化;流式细胞术检测瞬时转染和稳定转染细胞凋亡指数的变化,绘制细胞生长曲线,探讨survivin shRNA转染对细胞生长和增殖的影响.结果多重PCR结果示与无功能(对照组)shRNA处理组和磷酸盐缓冲液处理组比较,survivin shRNA瞬时转染和稳定转染细胞survivin基因mRNA表达均显著下降,抑制率分别为66.67

作者:古聪敏;朱有凯;吴红阳;张萌;廖冰;林汉良

来源:中华血液学杂志 2006 年 27卷 6期

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作者:
古聪敏;朱有凯;吴红阳;张萌;廖冰;林汉良
来源:
中华血液学杂志 2006 年 27卷 6期
标签:
基因,survivin RNA干扰 细胞凋亡 细胞系,Jurkat
目的研究应用载体表达短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术抑制人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞survivin基因的表达,探讨survivin基因表达缄默对Jurkat细胞凋亡和增殖的影响.方法构建针对survivin基因的shRNA重组质粒并转染至Jurkat细胞,分别用多重PCR和Western blot法检测瞬时转染和稳定转染细胞survivin基因mRNA和蛋白表达水平的变化;流式细胞术检测瞬时转染和稳定转染细胞凋亡指数的变化,绘制细胞生长曲线,探讨survivin shRNA转染对细胞生长和增殖的影响.结果多重PCR结果示与无功能(对照组)shRNA处理组和磷酸盐缓冲液处理组比较,survivin shRNA瞬时转染和稳定转染细胞survivin基因mRNA表达均显著下降,抑制率分别为66.67