目的 观察顺铂(DDP)作用下肺癌A549细胞系的细胞周期和凋亡的动力学特点,以及灭活细胞周期检测点激酶1(Chk1)和细胞周期检测点激酶2(Chk2)基因对DDP诱导的肺癌细胞凋亡的影响.方法 优化转染条件后,将肺癌A549细胞分为8组进行转染,分别为正常组(未经任何处理的A549细胞)、对照组(A549细胞接受10 μmol/L的DDP作用12 h)、转染Chk1正义寡核苷酸链(sODN)组、转染Chk1反义寡核苷酸链(AsODN)组、转染Chk2 sODN组、转染Chk2 AsODN组、联合转染Chk1和Chk2 sODN组以及联合转染Chk1和Chk2 AsODN组,其中后6组转染24 h后再以10 μmol/L的DDP处理12 h.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法,检测转染Chk1或Chk2 sODN、AsODN后,A549细胞中Chk1或Chk2 mRNA和蛋白的表达.采用流式细胞仪Annexin V-FITC法和Sub-G1法,检测转染Chk1和(或)Chk2 sODN、AsODN后,DDP作用下A549细胞的细胞周期和凋亡变化.结果 10μmol/L的DDP作用12 h后,非同步化处理的A549细胞出现了明显的S期阻滞现象.转染24 h后,Chk1或Chk2 AsODN可明显抑制A549细胞中Chk1 mRNA和蛋白或Chk2 mRNA和蛋白的表达.与单独转染Chk1或Chk2 sODN组相比,单独转染Chk1或Chk2 AsODN组DDP诱导下A549细胞的凋亡率约提高了1～2倍(P＜0.05);但联合转染Chk1和Chk2 AsO

作者：叶飞；谢大兴；卢运萍；高庆蕾

来源：中华肿瘤杂志 2009 年 31卷 11期