目的 探讨E2F-1基因沉默后对人胃癌顺铂(DDP)耐药细胞株SGC7901/DDP多药耐药性的影响及可能的作用机制.方法 将人胃癌耐药细胞株SGC7901/DDP接种于6孔板,并分为以E2F-1基因沉默重组慢病毒颗粒Lv-shRNA-E2F-1感染的SGC7901/DDP细胞(实验组)、以对照慢病毒颗粒Lv-shRNA-NC感染的SGC7901/DDP细胞(阴性对照组)以及常规培养的SGC7901/DDP细胞(空白对照组).采用Western blot技术检测各组细胞中E2F-1蛋白的表达,采用四甲基偶氮唑蓝法检测阿霉素、氟尿嘧啶和DDP对各组细胞的半数抑制浓度(IC50),采用流式细胞术检测各组细胞中阿霉素的泵出率和细胞凋亡率,采用半定量RT-PCR和Western blot技术检测各组细胞中多药耐药基因1(MDR1)、多药耐药相关蛋白(MRP)及凋亡相关基因cyclin D1、c-Myc、Skp2 mRNA和蛋白的表达水平.结果 实验组、阴性对照组和空白对照组SGC7901/DDP细胞中E2F-1蛋白的相对表达量分别为0.794±0.033、1.487±0.082和1.511 ±0.084,实验组SGC7901/DDP细胞中E2F-1蛋白的相对表达量较阴性对照组和空白对照组分别下降46.6%和47.5% (P <0.01).阿霉素、氟尿嘧啶和DDP对实验组SGC7901/DDP细胞的IC50均较阴性对照组和空白对照组明显降低(均P<0.01).实验组、阴性对照组和空白对照组SGC7901/DDP细胞中阿霉素
作者:廉超;杨杰;王晓通;谢玉波;肖强
来源:中华肿瘤杂志 2014 年 36卷 3期