目的:观察乙型肝炎病毒X (hepatitis B virus X,HBX)蛋白对L02肝细胞的转化作用及其对端粒酶活性的影响.方法:构建PEGFP-N1-HBX质粒,脂质体介导转染L02细胞,倒置荧光显微镜观察EGFP的表达.稳定转染后Western blotting检测L02细胞中HBX蛋白的表达,电子显微镜观察L02细胞的形态,MTT法检测细胞的增殖,RT-PCR检测L02细胞端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达,TRAP-PCR银染法检测L02细胞端粒酶活性的变化.结果:成功构建了PEGFP-N1-HBX质粒,稳定转染后L02细胞中有HBX蛋白的表达,且细胞形态明显幼稚化,有恶性变趋势,细胞增殖能力明显增加(P<0.05),细胞hTERT mRNA表达明显增加,端粒酶被激活.结论:HBX蛋白可诱导正常肝细胞的恶性转化,上调hTERT mRNA的表达并能激活端粒酶.
作者:贺丹丹;邓志华;杨倩
来源:癌变·畸变·突变 2012 年 24卷 3期