目的构建含HCMV pp65336~507位氨基酸的重组真核表达质粒pcDNA3.1-pp65作为HCMV pp65基因疫苗,观察其诱导小鼠的细胞免疫应答情况.方法以6~8周龄♀Balb/c小鼠为动物模型,试验组和对照组各6只.试验组于股四头肌注射pp65 DNA疫苗,对照组注射空载体pcDNA 3.1.2组小鼠分别在0 d、5 d、3周注射该DNA疫苗200 μg.在末次免疫后3 d,无菌取小鼠脾细胞,并用ConA和重组HCMV pp65336~507作为抗原刺激,吉氏液染色观察T淋巴细胞的形态学变化,并计算转化率.MTT法对脾脏的特异性杀伤细胞率和淋巴细胞的增殖指数进行测定,间接ELISA定量检测脾细胞上清中IFN-γ的含量.结果 pp65336~507抗原刺激的DNA疫苗免疫鼠脾细胞体积变大,胞浆增多,核仁增多;淋巴细胞增殖试验示pp65336~507抗原能特异性刺激免疫鼠脾细胞增殖;试验组IFN-γ较对照组增高,其含量为800 ng/L.与对照组比较,差异均具显著性(P<0.05).试验组及对照组脾细胞杀伤率分别为:56.05
作者:李艳秋;余莉;方草晖;张文艳;王明丽
来源:安徽医科大学学报 2003 年 38卷 2期