目的:研究黄芪甲苷(As-IV)对高胰岛素诱导人肾小球系膜细胞(HMCs)损伤的保护作用及其机制。方法以HMCs 为研究对象,用 MTT 法检测不同浓度胰岛素作用不同时间后对 HMCs 增殖的影响,筛选胰岛素的量效与时效关系;实验设正常组、高胰岛素(64 nmol/L)组、二碘苯(DPI 10μmol/L)组、抗氧化剂 Tempol(100μmol/L)组、PI3K/Akt 信号通路抑制剂 LY294002(10μmol/L)组与黄芪甲苷(As-Ⅳ25、50、100μmol/L)组。培养48 h 后,MTT 法检测 HMCs 的细胞增殖状况,DCFH-DA 法测定细胞内活性氧(ROS)含量, Western blot 法检测 NADPH 氧化酶4(NOX4)、磷酸化蛋白激酶 B(p-PKB)(又称 p-Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)蛋白表达的变化。结果随着浓度增加与作用时间延长,胰岛素对 HMCs 增殖有促进作用且有量效与时效关系;与高胰岛素组比较,DPI 组、Tempol 组、LY294002组与 As-IV 25、50、100μmol/L 组均能有效抑制高胰岛素诱导的细胞增殖,减少细胞内 ROS 含量,降低 NOX4、p-Akt、p-mTOR 蛋白的高表达(P <0.05,P <0.01)。结论胰岛素呈时间和浓度依赖性促 HMCs 细胞增殖;As-IV 对高胰岛素诱导的 HMCs 有保护作用,其作用机制可能与抑制 HMCs 的过度增殖,减少
作者:李贵平;李维祖;段文婷;李卫平
来源:安徽医科大学学报 2015 年 11期