目的 研究miR-29c能否通过调控沉默信息调节因子2相关酶类1(SIRT1)的表达影响动脉粥样硬化(AS)进程中氧化应激及炎症反应.方法 采用ApoE-/-基因敲除小鼠(ApoE-/-),经适应性饲养,于6周龄时以高脂饲料喂养,构建AS模型(AS组);以C57BL/6J小鼠为正常对照组,给予普通饲料喂养.12周后取主动脉,检测miR-29c表达以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA水平、活性氧(ROS)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶水平.培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),分别转染miR-29c mimic和antagomir,以氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)(50 μg/ml)进行刺激,检测各组TNF-α表达、ROS、NADPH氧化酶水平.此外,实时PCR和Western blot检测oxLDL诱导的内皮细胞损伤模型中SIRT1 mRNA及蛋白表达水平变化,并进一步检测正常细胞转染miR-29c mimic与antagomir后SIRT1 mRNA及蛋白表达水平.结果 与正常组比较,AS组miR-29c表达及TNF-α mRNA、ROS、NADPH氧化酶水平均明显升高(P<0.05).oxLDL刺激后,与.对照组相比,转染miR-29c an-tagomir细胞中TNF-α、ROS、NADPH氧化酶水平均明显降低(P<0.05);与之相反,转染miR-29c mimic细胞中TNF-α、ROS、NADPH氧化酶水平明显升高(P<0.05).此外,oxLDL刺激HUVEC后,细胞的SIRT1 mRNA与蛋白表达水平均有所降低(P<0.05).
作者:李贞贞;唐海涛;王怡;周青;汪渊;朱华庆
来源:安徽医科大学学报 2020 年 55卷 2期