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目的 探究miR-373-3p通过靶向Rab蛋白22a(Rab22a)对结肠癌SW480细胞增殖和转移的调节作用.方法 RT-PCR检测结肠癌组织和细胞中miR-373-3p的表达.荧光素酶报告检测miR-373-3p和Rab22a相互作用关系.将SW480细胞分为空白对照组(SW480组)、阴性对照组(mimic NC组)、miR-373-3p mimic组、pLV-Rab22a组、pLV-Rab22a+miR-373-3p组,各组分别转染miR-373-3p或Rab22a重组慢病毒,RT-PCR检测miR-373-3p和Rab22a转录水平,CCK-8法检测细胞增殖水平,划痕愈合法检测细胞迁移,Transwell法检测细胞侵袭,Western blot检测Rab22a、Ki67、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)蛋白表达.结果 与正常结肠组织比较,结肠癌组织中miR-373-3p表达降低.与人正常结肠细胞NCM460比较,结肠癌细胞株miR-373-3p均降低.在荧光素酶报告实验中,与Rab22a WT+mimic NC比较,Rab22a WT+miR-373-3p mimic荧光素酶活性降低.在细胞实验中,与SW480组比较,miR-373-3p mimic组miR-373-3p表达和E-cadherin蛋白表达升高,Rab22a基因和蛋白表达、细胞增殖水平、迁移和侵袭能力、Ki67、N-cadherin蛋白表达降低,pLV-Rab22a组细胞增殖水平、迁移和侵袭能力、Rab22a、Ki67、N-cadherin蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低;与pLV-Rab22a

作者:杨熹;丁永斌;宋冬梅;葛军;颜雪方

来源:安徽医科大学学报 2020 年 55卷 7期

知识库介绍

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作者:
杨熹;丁永斌;宋冬梅;葛军;颜雪方
来源:
安徽医科大学学报 2020 年 55卷 7期
标签:
结肠癌 miR-373-3p Rab22a 增殖 转移
目的 探究miR-373-3p通过靶向Rab蛋白22a(Rab22a)对结肠癌SW480细胞增殖和转移的调节作用.方法 RT-PCR检测结肠癌组织和细胞中miR-373-3p的表达.荧光素酶报告检测miR-373-3p和Rab22a相互作用关系.将SW480细胞分为空白对照组(SW480组)、阴性对照组(mimic NC组)、miR-373-3p mimic组、pLV-Rab22a组、pLV-Rab22a+miR-373-3p组,各组分别转染miR-373-3p或Rab22a重组慢病毒,RT-PCR检测miR-373-3p和Rab22a转录水平,CCK-8法检测细胞增殖水平,划痕愈合法检测细胞迁移,Transwell法检测细胞侵袭,Western blot检测Rab22a、Ki67、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)蛋白表达.结果 与正常结肠组织比较,结肠癌组织中miR-373-3p表达降低.与人正常结肠细胞NCM460比较,结肠癌细胞株miR-373-3p均降低.在荧光素酶报告实验中,与Rab22a WT+mimic NC比较,Rab22a WT+miR-373-3p mimic荧光素酶活性降低.在细胞实验中,与SW480组比较,miR-373-3p mimic组miR-373-3p表达和E-cadherin蛋白表达升高,Rab22a基因和蛋白表达、细胞增殖水平、迁移和侵袭能力、Ki67、N-cadherin蛋白表达降低,pLV-Rab22a组细胞增殖水平、迁移和侵袭能力、Rab22a、Ki67、N-cadherin蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低;与pLV-Rab22a