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目的:探讨miR-520a对结肠癌生物学行为的影响及其对RAB22A表达的调控.方法:应用分子生物学技术构建miR-520a的表达质粒(miR-520a)及抑制剂(anti-miR-520a),应用MTT和Transwell探讨miR-520a对结肠癌细胞株增殖和侵袭的影响.实时荧光定量PCR和蛋白印迹检测转染miR-520a对RAB22A的mRNA和蛋白表达水平的影响,构建RAB22A的野生型及突变型3'-UTR报告基因,报告基因分析miR-520a对RAB22A的调控.结果:miR-520a可以显著抑制结肠癌细胞的增殖和侵袭.蛋白印迹显示miR-520a可以显著抑制RAB22A的蛋白表达水平,而对mRNA表达无显著影响.报告基因分析显示miR-520a能够下调RAB22A的野生型3'-UTR报告基因的荧光表达,而对突变型报告基因的荧光表达影响不大.结论:miR-520a可能通过转录后调控癌基因RAB22A的表达抑制结肠癌细胞的增殖和侵袭,在结肠癌中发挥抑癌基因功能.

作者:张灵敏;崔曼莉;杜召召;路宁;闫蓉;张明鑫

来源:现代肿瘤医学 2019 年 27卷 22期

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作者:
张灵敏;崔曼莉;杜召召;路宁;闫蓉;张明鑫
来源:
现代肿瘤医学 2019 年 27卷 22期
标签:
miR-520a RAB22A 结肠癌 增殖 侵袭
目的:探讨miR-520a对结肠癌生物学行为的影响及其对RAB22A表达的调控.方法:应用分子生物学技术构建miR-520a的表达质粒(miR-520a)及抑制剂(anti-miR-520a),应用MTT和Transwell探讨miR-520a对结肠癌细胞株增殖和侵袭的影响.实时荧光定量PCR和蛋白印迹检测转染miR-520a对RAB22A的mRNA和蛋白表达水平的影响,构建RAB22A的野生型及突变型3'-UTR报告基因,报告基因分析miR-520a对RAB22A的调控.结果:miR-520a可以显著抑制结肠癌细胞的增殖和侵袭.蛋白印迹显示miR-520a可以显著抑制RAB22A的蛋白表达水平,而对mRNA表达无显著影响.报告基因分析显示miR-520a能够下调RAB22A的野生型3'-UTR报告基因的荧光表达,而对突变型报告基因的荧光表达影响不大.结论:miR-520a可能通过转录后调控癌基因RAB22A的表达抑制结肠癌细胞的增殖和侵袭,在结肠癌中发挥抑癌基因功能.