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目的 探究青藤碱(SIN)对胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其机制.方法 正常培养人胃正常黏膜上皮细胞GES-1、人胃癌细胞SGC-7901作对照组(Control),分别用0.5、1.0、2.5 mmol/L SIN处理细胞48h,并设立阳性对照(50 μmol/L塞来昔布),采用CCK-8法检测细胞生长,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭,划痕实验检测细胞迁移,Western blot检测Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达;经在线预测软件分析miR-33a-5p和乳酸脱氢酶A(LDHA)靶向关系,并通过双荧光素酶报告确认;将miR-33a-5p mimics转染SGC-7901细胞,采用RT-qPCR检测miR-33a-5p和LDHA mRNA的表达;重组构建过表达LDHA载体转染SGC-7901细胞,用0.5、1、2.5 mmol/L SIN处理细胞48h,检测细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移情况.结果 与Control组相比,SIN可提高SGC-7901细胞凋亡率、Bax、cleaved caspase-3、E-cadherin及miR-33a-5p的表达,并降低其存活率、侵袭数、迁移率、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin及LDHA mRNA的表达(P<0.05).LDHA是miR-33a-5p的预测靶点.SIN可上调miR-33a-5p的表达,并下调LDHA mRNA的表达(P<0.05);与Contorl组相比,过表达LDHA后,细胞SGC-7901的凋亡率下降,其LDHA蛋白表达、存

作者:青泓屹;魏寿江;李勋;周程继;张肖;祝晓娟;刘作良

来源:安徽医科大学学报 2020 年 55卷 9期

知识库介绍

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作者:
青泓屹;魏寿江;李勋;周程继;张肖;祝晓娟;刘作良
来源:
安徽医科大学学报 2020 年 55卷 9期
标签:
青藤碱 miR-33a-5p 乳酸脱氢酶A SGC-7901
目的 探究青藤碱(SIN)对胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其机制.方法 正常培养人胃正常黏膜上皮细胞GES-1、人胃癌细胞SGC-7901作对照组(Control),分别用0.5、1.0、2.5 mmol/L SIN处理细胞48h,并设立阳性对照(50 μmol/L塞来昔布),采用CCK-8法检测细胞生长,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭,划痕实验检测细胞迁移,Western blot检测Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达;经在线预测软件分析miR-33a-5p和乳酸脱氢酶A(LDHA)靶向关系,并通过双荧光素酶报告确认;将miR-33a-5p mimics转染SGC-7901细胞,采用RT-qPCR检测miR-33a-5p和LDHA mRNA的表达;重组构建过表达LDHA载体转染SGC-7901细胞,用0.5、1、2.5 mmol/L SIN处理细胞48h,检测细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移情况.结果 与Control组相比,SIN可提高SGC-7901细胞凋亡率、Bax、cleaved caspase-3、E-cadherin及miR-33a-5p的表达,并降低其存活率、侵袭数、迁移率、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin及LDHA mRNA的表达(P<0.05).LDHA是miR-33a-5p的预测靶点.SIN可上调miR-33a-5p的表达,并下调LDHA mRNA的表达(P<0.05);与Contorl组相比,过表达LDHA后,细胞SGC-7901的凋亡率下降,其LDHA蛋白表达、存