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目的:探讨茶多酚对人牙槽骨成骨细胞增殖和凋亡的影响及分子机制.方法:分离培养人牙槽骨成骨细胞,用含0.000 1~100 μg·ml-1茶多酚的DMEM培养基培养人牙槽骨成骨细胞,记为不同浓度茶多酚处理组,用不含茶多酚的正常培养基培养的细胞作为对照组;将pcDNA3.1-NC、pcDNA3.1-RUNX2、anti-NC、anti-miR-33a-5p、mimics-NC、miR-33a-5p分别转染至人牙槽骨成骨细胞中,记为pcDNA3.1-NC组、pcDNA3.1-RUNX2组、anti-NC组、anti-miR-33a-5p组、mimics-NC组、miR-33a-5p组.细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞增殖核抗原Ki67(Ki-67)、增殖细胞核抗原(PCNA)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、runt相关转录因子2(RUNX2)蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-33a-5p和RUNX2 mRNA表达;荧光素酶报告实验检测miR-33a-5p对RUNX2的靶向调控.结果:各浓度茶多酚处理的人牙槽骨成骨细胞的细胞活力显著升高,凋亡率显著降低(P<0.05),其中茶多酚浓度为1 μg·ml-1处细胞活力和凋亡率达到极值;1 μg·ml-1茶多酚处理的成骨细胞中Ki-67、PCNA、Bcl-2水平及RUNX2 mRNA和蛋白表达水平显著升高,Bax和miR-33a-5p水平显著降低(P<0.05).过表达RUNX2或

作者:王海琴;闫冰;李成

来源:中国药师 2021 年 24卷 6期

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作者:
王海琴;闫冰;李成
来源:
中国药师 2021 年 24卷 6期
标签:
茶多酚 miR-33a-5p runt相关转录因子2 成骨细胞 增殖 凋亡
目的:探讨茶多酚对人牙槽骨成骨细胞增殖和凋亡的影响及分子机制.方法:分离培养人牙槽骨成骨细胞,用含0.000 1~100 μg·ml-1茶多酚的DMEM培养基培养人牙槽骨成骨细胞,记为不同浓度茶多酚处理组,用不含茶多酚的正常培养基培养的细胞作为对照组;将pcDNA3.1-NC、pcDNA3.1-RUNX2、anti-NC、anti-miR-33a-5p、mimics-NC、miR-33a-5p分别转染至人牙槽骨成骨细胞中,记为pcDNA3.1-NC组、pcDNA3.1-RUNX2组、anti-NC组、anti-miR-33a-5p组、mimics-NC组、miR-33a-5p组.细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞增殖核抗原Ki67(Ki-67)、增殖细胞核抗原(PCNA)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、runt相关转录因子2(RUNX2)蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-33a-5p和RUNX2 mRNA表达;荧光素酶报告实验检测miR-33a-5p对RUNX2的靶向调控.结果:各浓度茶多酚处理的人牙槽骨成骨细胞的细胞活力显著升高,凋亡率显著降低(P<0.05),其中茶多酚浓度为1 μg·ml-1处细胞活力和凋亡率达到极值;1 μg·ml-1茶多酚处理的成骨细胞中Ki-67、PCNA、Bcl-2水平及RUNX2 mRNA和蛋白表达水平显著升高,Bax和miR-33a-5p水平显著降低(P<0.05).过表达RUNX2或