目的 探究自噬激活在丙泊酚诱导海马神经元凋亡中的作用.方法 取胎鼠提取分离原代海马神经元,随机分为对照组、丙泊酚组、雷帕霉素组与氯喹组.采用二甲氧唑黄比色法(XTT)和流式细胞术检测神经元凋亡,Western blot法检测自噬与凋亡相关蛋白表达.取老龄大鼠随机分为对照组、丙泊酚组、雷帕霉素组与氯喹组.以100 mg/kg丙泊酚连续麻醉1周,期间以50 mg/kg雷帕霉素和10 mg/kg氯喹治疗.采用Morris水迷宫检测大鼠认知功能,TUNEL染色检测海马神经元凋亡情况,高尔基染色观察海马神经元自噬情况,Western blot法检测自噬与凋亡相关蛋白表达.结果 离体试验中,雷帕霉素逆转了丙泊酚造成的细胞凋亡.与丙泊酚组相比,雷帕霉素组微管相关蛋白轻链3Ⅱ/微管相关蛋白轻链3Ⅰ(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)与Beclin-1表达增加,但凋亡蛋白剪切的半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase-3)与Bax表达降低.在体研究中,与丙泊酚组相比,雷帕霉素组水迷宫逃避潜伏期减少,且雷帕霉素组TUNEL阳性细胞数与自噬小体数量减少.此外,雷帕霉素组哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达降低,且LC3Ⅱ/LC3Ⅰ与Beclin-1表达增加,Cleaved-caspase-3与Bax表达降低.但氯喹对自噬和凋亡相关蛋白没有影响.结论 雷帕霉素通过抑制mTOR信号活化,进一步激活了细胞自噬,改善了丙泊酚造成
作者：梅静；喇宏玲；徐桂萍
来源：安徽医科大学学报 2022 年 57卷 10期
