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目的:研究宫颈癌Hela细胞中Toll样受体9(TLR9)的表达情况及TLR9对宫颈癌Hela细胞抗凋亡能力的影响,寻求宫颈癌免疫治疗的新途径。方法体外培养宫颈癌Hela细胞株,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Hela细胞中TLR9 mRNA的表达情况;四甲基偶氮唑盐(MTT)检测不同浓度人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对Hela细胞生长抑制情况;流式细胞术(FCM)检测CpG-ODN预刺激对Hela细胞抗TRAIL诱导凋亡能力的影响。结果①TLR9 mRNA在Hela细胞中表达,应用CpG-ODN刺激24 h后,TLR9 mRNA的表达增加,与PBS对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。②MTT比色法检测显示, TRAIL蛋白可抑制Hela细胞生长,随着TRAIL蛋白浓度增加,抑制率增加。并且计算半抑制浓度IC50(223.092±3.850)ng/mL。③流式细胞术检测显示,TLR9特异性激动剂CpG-ODN刺激Hela细胞后,TRAIL诱导细胞凋亡率为(15.32±2.46)%,与无CpG-ODN预刺激组[(43.49±2.04)%]相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 TLR9特异性激动剂CpG-ODN能够增强Hela细胞抵抗TRAIL诱导的细胞凋亡能力,提示TLR9在肿瘤的恶性进程中发挥作用,为宫颈癌的免疫治疗提供新的思路。

作者:陈颍;周家德

来源:安徽医学 2015 年 4期

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作者:
陈颍;周家德
来源:
安徽医学 2015 年 4期
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宫颈癌 Hela细胞 Toll样受体9 细胞凋亡 CpG-ODN Cervical cancer Hela cells Toll-like receptor 9 Cell apoptosis CpG-ODN
目的:研究宫颈癌Hela细胞中Toll样受体9(TLR9)的表达情况及TLR9对宫颈癌Hela细胞抗凋亡能力的影响,寻求宫颈癌免疫治疗的新途径。方法体外培养宫颈癌Hela细胞株,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Hela细胞中TLR9 mRNA的表达情况;四甲基偶氮唑盐(MTT)检测不同浓度人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对Hela细胞生长抑制情况;流式细胞术(FCM)检测CpG-ODN预刺激对Hela细胞抗TRAIL诱导凋亡能力的影响。结果①TLR9 mRNA在Hela细胞中表达,应用CpG-ODN刺激24 h后,TLR9 mRNA的表达增加,与PBS对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。②MTT比色法检测显示, TRAIL蛋白可抑制Hela细胞生长,随着TRAIL蛋白浓度增加,抑制率增加。并且计算半抑制浓度IC50(223.092±3.850)ng/mL。③流式细胞术检测显示,TLR9特异性激动剂CpG-ODN刺激Hela细胞后,TRAIL诱导细胞凋亡率为(15.32±2.46)%,与无CpG-ODN预刺激组[(43.49±2.04)%]相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 TLR9特异性激动剂CpG-ODN能够增强Hela细胞抵抗TRAIL诱导的细胞凋亡能力,提示TLR9在肿瘤的恶性进程中发挥作用,为宫颈癌的免疫治疗提供新的思路。