目的 探究微小RNA(miRNA)-548a-3p对脂多糖(LPS)诱导的结肠上皮细胞的凋亡和炎症反应影响及其机制.方法 收集2019年1月至2020年5月于南方医科大学深圳医院就诊,经肠镜及病理学检查确诊为活动期溃疡性结肠炎35例患者的肠黏膜组织及正常肠道黏膜组织.取正常结肠上皮细胞分为6组:对照组不做任何处理;LPS组给予50μg/mL LPS处理;miR-NC组、miR-548-3p mimics组、miR-548-3p inhibitor组、miR-574-3p mimics+pcDNA3.1-toll样受体4(TLR4)组分别转染相应序列,随后使用等量LPS处理.实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-548a-3p表达,CCK-8法检测细胞增殖,酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素8(IL-8)含量,双荧光素酶报告基因实验验证miR-548a-3p与TLR4的结合关系;Western blot实验检测TLR4、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因-相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸大冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达.结果 miR-548a-3p在溃疡性结肠炎患者肠黏膜组织中相对表达水平为(1.130±0.568),低于正常肠黏膜组织(1.684±0.733),差异有统计学意义(P<0.05);LPS组中miR-548a-3p表达水平为(0.463±0.042),低于对照组的(1.001±0.090),差异有统计学意义(P<0.05).转染后,miR-548a-3p inhibitor组中TNF-α、IL-8、细胞凋亡
作者:凌琳;游丽娟;袁葵
来源:安徽医学 2022 年 43卷 8期