目的 观察选择性上调pSmad 3C/3L基因对人肝星状细胞(LX-2)增殖及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)和Ⅰ型胶原蛋白(Collagen-Ⅰ)表达的影响.以进一步探究pSmad 3C/3L在肝纤维化进展中的作用机制.方法 采用脂质体转染的技术(FuGENE?HD)向LX-2细胞转染野生型Smad3基因(Smad3 WT)、Smad3连接区磷酸化位点突变的基因(Smad3 EPSM)及Smad3 C末端磷酸化位点突变的基因(Smad33S-A)3种质粒,选择性上调LX-2细胞中pSmad 3C/3L的表达水平,以蛋白质印迹法(Western Blot)验证转染效率并检测LX-2细胞中α-SMA、PAI-1和Collagen-Ⅰ的蛋白表达水平.MTT法检测选择性上调pSmad 3C/3L对LX-2细胞增殖能力的影响.结果 转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激1 h后,与LX-2对照组相比,转染3种质粒组Smad3蛋白表达水平均升高[(0.48±0.02),(0.57±0.03),(0.60±0.02),(0.59±0.03);P<0.05];与Smad3 WT组相比,转染Smad3 EPSM质粒组pSmad3C蛋白表达水平明显升高[(0.33±0.02)比(0.44±0.01),P<0.05],转染Smad33S-A质粒组pSmad3L蛋白表达水平明显升高[(0.36±0.01)比(0.42±0.02),P<0.05].MTT结果显示,转染Smad3 EPSM质粒可抑制LX-2细胞增殖,而转染Smad33S-A质粒可促进LX-2细胞的增殖[吸光度值(0.48±0.03)比(0.93±0

作者：徐媛媛；闻广华；张冲；杨雁

来源：安徽医药 2019 年 23卷 12期