目的 探讨下调微小RNA(miR)-183表达对肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞增殖凋亡的影响及机制.方法 2018年12月至2019年7月,体外培养SK-NEP-1细胞,分为对照组(细胞正常培养)、抑制剂阴性对照组(Anti-NC组)(转染Anti-NC至SK-NEP-1细胞)、miR-183抑制剂组(Anti-miR-183组)(转染Anti-miR-183至SK-NEP-1细胞)、Anti-miR-183+小干扰RNA阴性序列(si-NC)组(共转染Anti-miR-183和si-NC至SK-NEP-1细胞)和Anti-miR-183+程序性细胞死亡4小干扰RNA(si-PDCD4)组(共转染Anti-miR-183和si-PDCD4至SK-NEP-1细胞),实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)测定miR-183,MTT法检测细胞增殖变化,平板克隆实验检测细胞克隆能力,流式细胞术测定细胞凋亡变化,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞中活化胱天蛋白酶-3(cleaved-caspase-3)和PDCD4蛋白水平.双荧光素酶报告基因实验验证miR-183与PDCD4的靶向关系.结果 Anti-miR-183组miR-183表达水平为(0.32±0.04),显著低于Anti-NC组(0.98±0.11)(P<0.05).Anti-miR-183组细胞增殖活性为(0.20±0.02)、克隆形成数为(213.69±20.94)个,均低于Anti-NC组[(0.40±0.03)、(312.87±22.28)个](P<0.05);Anti-miR-183组细胞凋亡率为(16.47±1.58)％、cleaved-caspase-3蛋白水平为(0.69±0.09),均高

作者：闫凡；黄彩虹

来源：安徽医药 2022 年 26卷 3期