对由原核载体表达的人乙醛脱氢酶2(Aldehyde dehydrogenase 2,简称ALDH2)纯化工艺、酶活性改善、稳定性以及保存条件分别进行了参数的优化,以期为ALDH2商品化剂型开发提供理论依据.通过NAD (P)+酶活测定法,检测不同纯化工艺、金属离子以及不同保存条件对ALDH2的酶活性的影响.通过SDS-PAGE检测ALDH2在模拟胃液和胰液中的稳定性.结果显示,低离子磷酸盐缓冲液透析有利于ALDH2酶活性的恢复,且真空冷冻干燥处理可导致ALDH2酶活性下降.K+、Zn2+、Mg2+、Mn2+、Ca2+均能提高ALDH2酶活性.ALDH2在模拟胃液中稳定性良好,但在模拟胰液中迅速被降解.与此同时,ALDH2酶液在-20℃下能良好地保持其稳定性及酶活,但在4℃和30℃下保存一个月酶活急剧下降.以上结果表明,低离子磷酸盐缓冲液透析法、K+均能提高ALDH2的酶活性,同时该酶可耐受模拟胃液的降解作用,且添加山梨酸钾的ALDH2于-20℃可良好地保持其稳定性及酶活.
作者：王荷花；潘博宇；黄娟；陈孝平；吴元欣
来源：氨基酸和生物资源 2015 年 37卷 4期
