目的 探讨neu RNAi对卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP细胞生长、凋亡及药物敏感性的作用,寻找下调基因表达并逆转化疗耐药的方法,为卵巢癌的基因治疗探索新途径.方法 应用含有U6启动子的pSilencer 1.0-U6表达载体构建neu基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(pSilencer-neu),用脂质体方法将pSilencer-neu转染卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP,另设未转染组及转染pSilencer-control组为对照.显微镜下观察转染前后细胞的变化;用RT-PCR及Western Blot检测neu基因mRNA及蛋白的表达;MTT法检测细胞生长情况;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期的变化;加入顺铂后检测BNAi对SKOV3/DDP顺铂药物敏感性的影响.结果 neu RNAi可明显下调卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP中neu的基因表达;使其细胞生长受到抑制,生长速度减慢,生长曲线低平;细胞凋亡增加且细胞周期发生变化,G1/G0期细胞增多,S期细胞则减少;顺铂耐药实验显示,转染RNAi的SK-OV3/DDP细胞IC50明显下调,细胞凋亡率显著增加.结论 应用RNAi可以部分阻抑neu基因在卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP中的表达,使SKOV3/DDP细胞生长减慢、凋亡增加,而且对顺铂的敏感性增强.
作者：张欣；杨尚斌；张果；朱红霞；吴令英；徐宁志
来源：癌症进展 2010 年 08卷 4期
