目的 探讨DNA甲基转移酶1(DNMT1)通过miRNA-148b-3p调控人脑胶质瘤U87细胞对替莫唑胺(TMZ)耐药性的作用机制.方法 采用TMZ长期浓度梯度递增法体外建立U87/TMZ耐药细胞系,并检测U87细胞和U87/TMZ耐药细胞多药耐药相关基因1(MDR1)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)基因的相对表达量,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况.将DNMT1抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)作用于U87细胞,比较作用前后U87细胞miRNA-148b-3p的相对表达量.将pcDNA-DNMT1过表达载体转染至U87/TMZ耐药细胞系,采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)法检测U87/TMZ耐药细胞miRNA-148b-3p的相对表达量,并采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力.结果 U87/TMZ耐药细胞中MDR1、Bcl-2 mRNA的相对表达量均明显高于U87细胞,细胞凋亡率也明显低于U87细胞,差异均有统计学意义(P﹤0.01).U87细胞miRNA-148b-3p的相对表达量明显低于U87/TMZ耐药细胞,DNMT1 mRNA的相对表达量明显高于U87/TMZ耐药细胞,差异均有统计学意义(P﹤0.01).5-Aza-CdR处理后的U87细胞miRNA-148b-3p表达量明显高于未经5-Aza-CdR处理的U87细胞(P﹤0.01).pcDNA-DNMT1组U87/TMZ细胞中miRNA-148b-3p启动子区甲基化水平高于空白对照组和阴性对照组细胞,差异均有统计学意义(P﹤0.05).不同浓度TMZ溶液处

作者：彭耀中；杜鹏；张学勇

来源：癌症进展 2019 年 17卷 18期