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目的:探讨IncRNA POU3F3通过调节MGMT的表达影响高级别脑胶质瘤细胞对替莫唑胺(temozolomide,TMZ)耐药及其作用机制.方法:选取2016年1月至2018年1月北京大学国际医院神经外科收治的60例患者组织标本,其中,脑外伤患者12例(正常组)、初发高级别脑胶质瘤患者30例(初发组)、复发高级别脑胶质瘤患者[复发组,已经接受了手术治疗+TMZ综合治疗再次复发的人群]18例.采用1、2、4及8μg/ml TMZ诱导U251细胞并维持正常生长1周以构建抵抗U251 TMZ耐药细胞系(U251 TMZ-resistance,U251-TR);正常组采用相同体积的0.9%生理盐水处理U251细胞.采用qPCR和Wb检测正常脑组织及神经胶质瘤细胞中POU3F3和甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(methylguanine DNA methyltransferase,MGMT)mRNA和蛋白的表达水平.慢病毒转染构建稳定干扰POU3F3的U251-TR细胞系(U251-TR stable interference POU3F3,U251-TR siPOU3F3),MTT法验证U251-TR细胞并检测细胞TMZ IC50值,Wb检测细胞中MGMT蛋白的表达水平.结果:与正常组及初发组比较,复发组POU3F3表达显著增高(P<0.01),U251-TR细胞TMZ IC50值显著高于U251细胞(P<0.01),U251-TR siPOU3F3细胞TMZIC50值显著低于U251-TR细胞(均P<0.01),但高于U251细胞(P<0.01);U251-TR细胞POU3F3及MGMTmRNA和蛋白的表达

作者:段然;颜成睿;王磊

来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2019 年 26卷 3期

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作者:
段然;颜成睿;王磊
来源:
中国肿瘤生物治疗杂志 2019 年 26卷 3期
标签:
长链非编码RNA POU3F3 脑胶质瘤 替莫唑胺 耐药性 甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶
目的:探讨IncRNA POU3F3通过调节MGMT的表达影响高级别脑胶质瘤细胞对替莫唑胺(temozolomide,TMZ)耐药及其作用机制.方法:选取2016年1月至2018年1月北京大学国际医院神经外科收治的60例患者组织标本,其中,脑外伤患者12例(正常组)、初发高级别脑胶质瘤患者30例(初发组)、复发高级别脑胶质瘤患者[复发组,已经接受了手术治疗+TMZ综合治疗再次复发的人群]18例.采用1、2、4及8μg/ml TMZ诱导U251细胞并维持正常生长1周以构建抵抗U251 TMZ耐药细胞系(U251 TMZ-resistance,U251-TR);正常组采用相同体积的0.9%生理盐水处理U251细胞.采用qPCR和Wb检测正常脑组织及神经胶质瘤细胞中POU3F3和甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(methylguanine DNA methyltransferase,MGMT)mRNA和蛋白的表达水平.慢病毒转染构建稳定干扰POU3F3的U251-TR细胞系(U251-TR stable interference POU3F3,U251-TR siPOU3F3),MTT法验证U251-TR细胞并检测细胞TMZ IC50值,Wb检测细胞中MGMT蛋白的表达水平.结果:与正常组及初发组比较,复发组POU3F3表达显著增高(P<0.01),U251-TR细胞TMZ IC50值显著高于U251细胞(P<0.01),U251-TR siPOU3F3细胞TMZIC50值显著低于U251-TR细胞(均P<0.01),但高于U251细胞(P<0.01);U251-TR细胞POU3F3及MGMTmRNA和蛋白的表达