目的:构建耐药细胞株SMMC-7721/ADM,探讨miR-143在调控肝细胞癌耐阿霉素中的作用机制.方法:采用逐步递增阿霉素浓度法构建耐阿霉素细胞株SMMC-7721/ADM,评估其IC50值;采用荧光定量PCR技术检测miR-143、DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)、多耐药基因1(MDR1)变化、Bax和Bcl-2 mRNA表达水平;Western blotting检测DNMT3B蛋白表达;通过转染miR-143 mimics上调耐药细胞株SMMC-7721/ADM中miR-143表达水平后,检测耐药细胞IC50、侵袭能力、细胞凋亡、DNMT3B、MDR1变化.应用脂质体-2000瞬时转染miR-143 mimics于耐药细胞株,观察上述指标变化.结果:成功构建耐药细胞株SMMC-7721/ADM,IC50值升高78.97倍(P<0.01),miR-143表达量降低,DNMT3B、MDR1、Bax、Bcl-2表达量升高(P<0.05 ~P<0.01).转染miR-143 mimics后耐药细胞株IC50值降低57%,侵袭能力下降,细胞凋亡增加,DNMT3B表达减少,MDR1 mRNA表达减少(P<0.01).结论:miR-143可能通过降低DNMT3B表达提高肝细胞癌对阿霉素的敏感性.
作者:崔兵;韩正阳;万诚诚;刘纪君;贺晓珊;梅传忠
来源:蚌埠医学院学报 2018 年 43卷 2期