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目的 探究富马酸二甲酯(DMF)对糖尿病肾病(DN)自噬及足细胞功能的影响.方法 通过对大鼠腹腔注射50 mg/kg的STZ诱导了DN模型,DN组大鼠灌胃2 mL生理盐水,DN+25DMF组、DN+50DMF组和DN+75DMF组分别灌胃25、50和75 mg/(kg?d)的DMF,共治疗12周.检测各组大鼠的血糖、尿蛋白、血清尿素氮和肌酐水平.用Periodic Acid-Schiff(PAS)试剂盒对肾脏进行染色.通过Western blot或免疫荧光染色检测肾脏中nephrin、LC3、p62、p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR和p-ULK1的表达.此外,将小鼠足细胞系(MPC5)在高葡萄糖(HG,40 mmol/L)条件下用不同浓度的DMF(10、50和100μmol/L)处理24 h或36 h.使用CCK-8试剂盒测定细胞活力,通过Western blot测定细胞中的LC3和p62蛋白表达水平.结果 与DN组比较,DN+25DMF、DN+50DMF和DN+75DMF组大鼠的血糖、尿蛋白、血清尿素氮和肌酐水平显著降低,肾小球系膜基质明显减少,肾组织中nephrin的表达水平显著升高(P<0.05).与DN组比较,DN+25DMF、DN+50DMF和DN+75DMF组大鼠肾组织中LC3II的表达水平显著升高,而p62显著降低,大鼠足细胞中的自噬体数目显著升高(P<0.05).与DN组比较,DN+25DMF、DN+50DMF和DN+75DMF组大鼠肾组织中AMPK、mTOR和ULK1磷酸化显著升高(P<0.05).与HG组比较,HG+10DMF、HG+50DMF和HG+100DMF组M

作者:闫丽晶;张若;王月;魏玲云;田静宇;黄丽丽;李佳荣;李培杰

来源:标记免疫分析与临床 2021 年 28卷 3期

知识库介绍

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作者:
闫丽晶;张若;王月;魏玲云;田静宇;黄丽丽;李佳荣;李培杰
来源:
标记免疫分析与临床 2021 年 28卷 3期
标签:
富马酸二甲酯 糖尿病肾病 自噬 足细胞 AMPK/mTOR/ULK1途径
目的 探究富马酸二甲酯(DMF)对糖尿病肾病(DN)自噬及足细胞功能的影响.方法 通过对大鼠腹腔注射50 mg/kg的STZ诱导了DN模型,DN组大鼠灌胃2 mL生理盐水,DN+25DMF组、DN+50DMF组和DN+75DMF组分别灌胃25、50和75 mg/(kg?d)的DMF,共治疗12周.检测各组大鼠的血糖、尿蛋白、血清尿素氮和肌酐水平.用Periodic Acid-Schiff(PAS)试剂盒对肾脏进行染色.通过Western blot或免疫荧光染色检测肾脏中nephrin、LC3、p62、p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR和p-ULK1的表达.此外,将小鼠足细胞系(MPC5)在高葡萄糖(HG,40 mmol/L)条件下用不同浓度的DMF(10、50和100μmol/L)处理24 h或36 h.使用CCK-8试剂盒测定细胞活力,通过Western blot测定细胞中的LC3和p62蛋白表达水平.结果 与DN组比较,DN+25DMF、DN+50DMF和DN+75DMF组大鼠的血糖、尿蛋白、血清尿素氮和肌酐水平显著降低,肾小球系膜基质明显减少,肾组织中nephrin的表达水平显著升高(P<0.05).与DN组比较,DN+25DMF、DN+50DMF和DN+75DMF组大鼠肾组织中LC3II的表达水平显著升高,而p62显著降低,大鼠足细胞中的自噬体数目显著升高(P<0.05).与DN组比较,DN+25DMF、DN+50DMF和DN+75DMF组大鼠肾组织中AMPK、mTOR和ULK1磷酸化显著升高(P<0.05).与HG组比较,HG+10DMF、HG+50DMF和HG+100DMF组M