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目的:探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)滑膜细胞中白三烯B4(LTB4)诱导肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)mRNA表达的定量测定方法.方法:RA患者的滑膜细胞进行原代培养,加入外源性LTB4或者在LIT存在的情况下,分别加入MK-886(5-脂氧合酶激动蛋白抑制剂)和苯丁抑制素(Bestatin,LTA4水解酶抑制剂),采用TaqMan PCR来定量检测滑膜细胞中TNF-α和IL-1β mRNA水平的表达.结果:原代培养的RA滑膜细胞的基本TNF-α和IL-1β mRNA表达水平(TNF-α/GAPDH和IL-1β/GAPDH),分别为0.02±0.00和0.16±0.01.当加入外源性的LTB4 10-9和10-8 mol/L后,LTB4 10-9 mol/L使TNF-α RNA水平的表达增高了7倍,LTB4 10-8 mol/L使TNF-α mRNA水平的表达增高了15倍,LTB4 10-8 mol/L使IL-1β mRNA水平增高了1倍.而加入LIT刺激内源性的LTB4增高后,使TNF-α和IL-1β mRNA水平分别增高了145倍和12倍.在LIT存在的情况下,加入LTB4合成抑制剂MK-886(1 μmol/L,10 μmol/L)后,使TNF-α mRNA水平的表达分别下降15

作者:陈占昆;吕厚山

来源:北京大学学报(医学版) 2006 年 38卷 5期

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作者:
陈占昆;吕厚山
来源:
北京大学学报(医学版) 2006 年 38卷 5期
标签:
白三烯B4 肿瘤坏死因子α 白细胞介素1 关节炎,类风湿 聚合酶链反应
目的:探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)滑膜细胞中白三烯B4(LTB4)诱导肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)mRNA表达的定量测定方法.方法:RA患者的滑膜细胞进行原代培养,加入外源性LTB4或者在LIT存在的情况下,分别加入MK-886(5-脂氧合酶激动蛋白抑制剂)和苯丁抑制素(Bestatin,LTA4水解酶抑制剂),采用TaqMan PCR来定量检测滑膜细胞中TNF-α和IL-1β mRNA水平的表达.结果:原代培养的RA滑膜细胞的基本TNF-α和IL-1β mRNA表达水平(TNF-α/GAPDH和IL-1β/GAPDH),分别为0.02±0.00和0.16±0.01.当加入外源性的LTB4 10-9和10-8 mol/L后,LTB4 10-9 mol/L使TNF-α RNA水平的表达增高了7倍,LTB4 10-8 mol/L使TNF-α mRNA水平的表达增高了15倍,LTB4 10-8 mol/L使IL-1β mRNA水平增高了1倍.而加入LIT刺激内源性的LTB4增高后,使TNF-α和IL-1β mRNA水平分别增高了145倍和12倍.在LIT存在的情况下,加入LTB4合成抑制剂MK-886(1 μmol/L,10 μmol/L)后,使TNF-α mRNA水平的表达分别下降15