目的:探讨靶向B7-H3基因沉默对人恶性血液病细胞株在裸鼠体内成瘤和转移的影响及机制.方法:应用实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)和流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测13株恶性血液病细胞中B7-H3分子的表达水平,筛选高表达的U937、Maver和Z138细胞.分别利用慢病毒转染技术靶向敲减B7-H3,建立稳定低表达细胞株,应用qPCR和FCM验证基因沉默效果.将U937、Maver和Z138各自分为空白对照组(non-infected control group,CON)、靶向B7-H3敲减组(B7-H3 knockdown group,KD)和阴性无关序列对照组(negative nontargeted control infected group,NC),将以上9组分别构建裸鼠皮下移植瘤模型,比较肿瘤生长和转移情况,免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色检测Ki-67表达,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)水平.结果:筛选B7-H3分子高表达的U937、Maver和Z138细胞进行靶向敲减B7-H3,成功建立稳定低表达细胞株.U937、Maver和Z138细胞各自的KD组与NC组比较,观察终点的平均肿瘤生长抑制率分别为61.83％(F=43.78,P<0.05)、59.12％(F=36.51,P<0.05)和67.37％(F=40.29,P<0.05),而各自NC组与CON组相比,肿瘤体积增长趋势差异无

作者：闫新星；张巍；王晶；克晓燕

来源：北京大学学报（医学版） 2017 年 49卷 2期